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EMBO J ; 27(11): 1609-21, 2008 Jun 04.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-18464793

RESUMO

The position of mRNA on 40S ribosomal subunits in eukaryotic initiation complexes was determined by UV crosslinking using mRNAs containing uniquely positioned 4-thiouridines. Crosslinking of mRNA positions (+)11 to ribosomal protein (rp) rpS2(S5p) and rpS3(S3p), and (+)9-(+)11 and (+)8-(+)9 to h18 and h34 of 18S rRNA, respectively, indicated that mRNA enters the mRNA-binding channel through the same layers of rRNA and proteins as in prokaryotes. Upstream of the P-site, the proximity of positions (-)3/(-)4 to rpS5(S7p) and h23b, (-)6/(-)7 to rpS14(S11p), and (-)8-(-)11 to the 3'-terminus of 18S rRNA (mRNA/rRNA elements forming the bacterial Shine-Dalgarno duplex) also resembles elements of the bacterial mRNA path. In addition to these striking parallels, differences between mRNA paths included the proximity in eukaryotic initiation complexes of positions (+)7/(+)8 to the central region of h28, (+)4/(+)5 to rpS15(S19p), and (-)6 and (-)7/(-)10 to eukaryote-specific rpS26 and rpS28, respectively. Moreover, we previously determined that eukaryotic initiation factor2alpha (eIF2alpha) contacts position (-)3, and now report that eIF3 interacts with positions (-)8-(-)17, forming an extension of the mRNA-binding channel that likely contributes to unique aspects of eukaryotic initiation.


Assuntos
Fator de Iniciação 3 em Eucariotos/metabolismo , Iniciação Traducional da Cadeia Peptídica , RNA Mensageiro/metabolismo , Proteínas Ribossômicas/metabolismo , Ribossomos/metabolismo , Animais , Sequência de Bases , Fator de Iniciação 3 em Eucariotos/química , Fator de Iniciação 3 em Eucariotos/efeitos da radiação , Humanos , Camundongos , Conformação Proteica , RNA Mensageiro/química , RNA Mensageiro/efeitos da radiação , Proteínas Ribossômicas/química , Proteínas Ribossômicas/efeitos da radiação , Ribossomos/química , Ribossomos/efeitos da radiação , Tiouridina/química , Raios Ultravioleta
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