RESUMO
A novel bicyclic prostaglandin analogue, (1S)-[1 alpha, 2 alpha(Z),3 alpha(1E,3S*,4R*),4 alpha]-7-[3-(3-hydroxy-4-phenyl-1-pentenyl)-7- oxabicyclo[2.2.1]hept-2-yl]-5-heptenoic acid (4), was found to be a potent and selective thromboxane A2 (TxA2) receptor antagonist. Alcohol 4 was the only member in a series of allylic alcohols which did not display direct contractile activity in the rat stomach strip model. Alcohol 4 was effective in the inhibition of (a) arachidonic acid induced platelet aggregation of human platelet-rich plasma (I50 = 0.65 +/- 0.1 microM); (b) 11,9-epoxymethano-PGH2 induced contraction of guinea pig trachea (pA2 = 8.0 +/- 0.2) or rat aorta (pA2 = 8.1 +/- 0.2); and (c) arachidonic acid induced bronchoconstriction in the anesthetized guinea pig (1 mg/kg iv). A radioiodinated analogue of 4 bound in a specific and saturable manner to human platelet membranes with a Kd = 2.3 +/- 0.9 nM. Modification of the alpha-chain, in an attempt to minimize in vivo metabolism, resulted in TxA2 receptor antagonists of reduced in vitro potency.
Assuntos
Receptores de Prostaglandina/antagonistas & inibidores , Tromboxano A2/análogos & derivados , Animais , Pressão Sanguínea/efeitos dos fármacos , Fibrinolíticos , Cobaias , Humanos , Técnicas In Vitro , Inibidores da Agregação Plaquetária , Ratos , Receptores de Tromboxanos , Mecânica Respiratória/efeitos dos fármacos , Tromboxano A2/antagonistas & inibidores , Tromboxano A2/síntese química , Tromboxano A2/farmacologiaRESUMO
The synthesis, binding and photoincorporation of a thromboxane A2/prostaglandin H2 (TXA2/PGH2) analog (9,11-dimethylmethano-11,12-methano-16-(3-[125I]iodo-4-azidophenyl )-13,14- dihydro-13-aza-15 alpha beta-omega-tetranor-TXA2) [( 125I]PTA-Azido) to washed human platelets was characterized. Kinetic analysis of the binding of [125I]PTA-Azido at 30 degrees C yielded a k1 of 1.83.10(7) M-1.min-1 and k -1 of 0.195 min-1, Kd = k -1/k1 = 11 nM. Incubation of washed human platelets with [125I]PTA-Azido followed by photolysis resulted in the radiolabelling of a number of platelet proteins as assessed by SDS-PAGE autoradiography. The radiolabelling of three of these protein bands could be either uniformly blocked or reduced with a series of structurally dissimilar TXA2/PGH2 receptor antagonists or agonists and corresponded to proteins with a molecular mass of 43, 39 and 27 kDa. In addition, the incorporation of [125I]PTA-Azido into the three proteins was stereoselectively blocked by a pair of optically active stereoisomers that are TXA2/PGH2 receptor antagonists. Two-dimensional gel electrophoresis indicated that the 43 kDa protein possessed a pI value of 5.6 and that the 27 kDa protein exists in at least three isoforms with pI values of 4.9, 5.1 and 5.3. The labelling pattern was not altered by a mixture of proteinase inhibitors. The data suggest that one or more of these specifically radiolabelled proteins may represent the human platelet TXA2/PGH2 receptor.
Assuntos
Marcadores de Afinidade/síntese química , Azidas/síntese química , Plaquetas/metabolismo , Endoperóxidos de Prostaglandina/sangue , Prostaglandinas H/sangue , Receptores de Prostaglandina/metabolismo , Tromboxano A2/análogos & derivados , Tromboxano A2/sangue , Azidas/sangue , Eletroforese em Gel Bidimensional , Humanos , Técnicas In Vitro , Cinética , Fotoquímica , Ensaio Radioligante , Receptores de Tromboxanos , Receptores de Tromboxano A2 e Prostaglandina H2 , Tromboxano A2/síntese químicaAssuntos
Tromboxano A2/análogos & derivados , Tromboxano A2/antagonistas & inibidores , Tromboxano A2/síntese química , Animais , Desenho de Fármacos , Músculo Liso/efeitos dos fármacos , Músculo Liso/fisiologia , Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Inibidores da Agregação Plaquetária/farmacologia , Relação Estrutura-Atividade , Tromboxano A2/farmacologiaAssuntos
Pulmão/efeitos dos fármacos , Tromboxano A2/farmacologia , Resistência das Vias Respiratórias/efeitos dos fármacos , Animais , Brônquios/efeitos dos fármacos , Cães , Cobaias , Pulmão/fisiologia , Complacência Pulmonar/efeitos dos fármacos , Masculino , Circulação Pulmonar/efeitos dos fármacos , Tromboxano A2/síntese químicaAssuntos
Tromboxano A2/análogos & derivados , Tromboxano A2/antagonistas & inibidores , Animais , Pressão Sanguínea/efeitos dos fármacos , Fenômenos Químicos , Química , Cobaias , Humanos , Técnicas In Vitro , Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Tromboxano A2/síntese química , Tromboxano A2/farmacologiaRESUMO
In 1975, Hamberg et al. reported evidence for the existence of an unstable platelet-aggregating factor which they named thromboxane A2 (TXA2) and for which they proposed a novel bicyclic oxetane structure (1, below) based on the short half-life of the factor (t1/2 (37 degrees C) = 32 s at pH 7.4) and the isolation of degradation products related to thromboxane (TXB2) (2, below). As natural TXA2 has not yet been isolated and characterized as a pure compound, we have synthesized the proposed structure (1) from TXB2 and compared its biological properties with those of authentic, biologically generated material. Here we present evidence that synthetic material having structure (1) is indistinguishable from platelet-derived TXA2 in various biological assays and that the proposed structure (1) for TXA2 is correct.
Assuntos
Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Tromboxano A2/síntese química , Tromboxanos/síntese química , Plaquetas/efeitos dos fármacos , Fenômenos Químicos , Química , Humanos , Endoperóxidos Sintéticos de Prostaglandinas/farmacologia , Prostaglandina H2 , Prostaglandinas H/farmacologia , Tromboxano A2/farmacologiaAssuntos
Receptores de Superfície Celular/efeitos dos fármacos , Receptores de Prostaglandina/efeitos dos fármacos , Tromboxano A2/análogos & derivados , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Ácido Araquidônico , Ácidos Araquidônicos/farmacologia , Compostos Bicíclicos com Pontes/síntese química , Compostos Bicíclicos com Pontes/farmacologia , Humanos , Indicadores e Reagentes , Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Receptores de Tromboxanos , Relação Estrutura-Atividade , Tromboxano A2/síntese química , Tromboxano A2/farmacologiaAssuntos
Endoperóxidos Sintéticos de Prostaglandinas , Receptores de Superfície Celular/efeitos dos fármacos , Receptores de Prostaglandina/efeitos dos fármacos , Tromboxano A2 , Tromboxanos , Animais , Carbono , Humanos , Nitrogênio , Endoperóxidos Sintéticos de Prostaglandinas/síntese química , Receptores de Tromboxanos , Relação Estrutura-Atividade , Enxofre , Tromboxano A2/análogos & derivados , Tromboxano A2/síntese química , Tromboxanos/síntese químicaAssuntos
Epoprostenol/metabolismo , Prostaglandinas/metabolismo , Receptores de Superfície Celular/metabolismo , Receptores de Prostaglandina/metabolismo , Tromboxano A2/farmacologia , Tromboxanos/farmacologia , Adenilil Ciclases/metabolismo , Animais , Cobaias , Contração Muscular/efeitos dos fármacos , Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Receptores de Epoprostenol , Receptores de Prostaglandina/efeitos dos fármacos , Receptores de Tromboxanos , Relação Estrutura-Atividade , Tromboxano A2/análogos & derivados , Tromboxano A2/síntese química , Tromboxano A2/metabolismo , Tromboxano-A Sintase/antagonistas & inibidores , Traqueia/efeitos dos fármacosAssuntos
Tromboxano A2/síntese química , Tromboxanos/síntese química , Monoterpenos Bicíclicos , Fenômenos Químicos , Química , Humanos , Técnicas In Vitro , Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Endoperóxidos de Prostaglandina/antagonistas & inibidores , Tromboxano A2/análogos & derivados , Tromboxano A2/farmacologia , VasodilatadoresAssuntos
Epoprostenol/síntese química , Prostaglandinas/síntese química , Tromboxano A2/síntese química , Tromboxanos/síntese química , Antibacterianos/síntese química , Antibióticos Antineoplásicos/síntese química , Ciclopentanos/síntese química , Lactamas/síntese química , Compostos Orgânicos de Estanho , Sesquiterpenos Policíclicos , Sesquiterpenos/síntese química , Estereoisomerismo , EstanhoAssuntos
Plaquetas/enzimologia , Oxirredutases/antagonistas & inibidores , Tromboxano A2/farmacologia , Tromboxano-A Sintase/antagonistas & inibidores , Tromboxanos/farmacologia , Animais , Aorta/efeitos dos fármacos , Bioensaio , Humanos , Cinética , Microssomos/enzimologia , Contração Muscular/efeitos dos fármacos , Músculo Liso Vascular/efeitos dos fármacos , Ratos , Relação Estrutura-Atividade , Tromboxano A2/análogos & derivados , Tromboxano A2/síntese químicaAssuntos
Tromboxano A2/síntese química , Tromboxanos/síntese química , Animais , Artérias/efeitos dos fármacos , Bioensaio , Colágeno/farmacologia , Cobaias , Humanos , Pulmão/efeitos dos fármacos , Métodos , Contração Muscular/efeitos dos fármacos , Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Coelhos , Relação Estrutura-Atividade , Tromboxano A2/análogos & derivados , Tromboxano A2/farmacologiaRESUMO
Pinane-thromboxane A2 (PTA2, [1alpha,2 beta(Z),-3 alpha (1E,3R*),5 alpha]-7-(3-(3-hydroxy-1-octenyl)-6,6-dimethylbicyclo[3.1.1]hept-2-yl)-5-heptenoic acid) has been synthesized and tested for biological activity in systems responsive to thromboxane A2, stable prostaglandin endoperoxide (PGH2) analogs, and prostatacyclin (PGI2). At low concentrations, PTA2 inhibited cat coronary artery constriction induced by stable prostaglandin endoperoxide analogs, and it stabilized liver lysosomes. At slightly higher concentrations, it inhibited platelet aggregation. At still higher concentrations, PTA2 inhibited thromboxane synthetase, but it had no effect on prostacyclin synthetase. The analog also had no effect on the inhibition of platelet aggregation by PGI2 or prostaglandin D2. It is suggested that PTA2 has a suitable biochemical profile for use as an antithrombotic agent.