Caracterização fenotípica e genotípica de isolados clínicos e ambientais de Cryptococcus gattii do Estado de São Paulo / Characterization phenotypic and genotypic isolates clinical and environmental of Criptococcus gattii from São Paulo State

RESUMO

Cryptococcus gattii engloba quatro tipos moleculares que podem causar criptococose em indivíduos, aparentemente saudáveis após inalação de partículas infectantes dispersas no meio ambiente. Resistência clínica a antifúngicos durante o tratamento, ou profilaxia, para a doença tem sido relatada. O manejo adequado desta infecção depende de vários fatores, incluindo o perfil de suscetibilidade antifúngica do agente etiológico. Porém, há poucos relatos disponíveis na literatura sobre a ação in vitro de fluconazol (FLU) e anfotericina B (AMB), fármacos de primeira escolha para casos de criptococose sobre isolados clínicos de C. gattii. Em relação à cepas ambientais, a mesma lacuna é observada, sendo que o monitoramento desses organismos é a base para se estabelecer pontos de corte epidemiológicos para definição de resistência a antifúngicos. A determinação da suscetibilidade é realizada por métodos de referência em provas de microdiluição. No entanto, esses métodos não tem bom desempenho para detectar resistência à AMB, e por isso, a metodologia de curvas de morte foi proposta para avaliar melhor a atividade in vitro desse fármaco. O objetivo deste estudo foi determinar a susceptibilidade a AMB e FLU de 55 amostras de C. gattii, sendo 90.9% clínicas e 9,1% ambientais, isoladas no Estado de São Paulo. Foi utilizada a técnica de PCR-RFLP para identificação dos tipos moleculares e o método de referência europeu (AFST-EUCAST) para determinação da concentração inibitória mínima (CIM). Estudos de curvas de morte foram realizados com 1 mg de AMB por L de meio de cultura (RPMI 1640). A maioria dos tipos moleculares, tanto clínicos quanto ambientais, foi VGII (94% e 60%, respectivamente), sendo os demais VGI. As CIMs de FLU variaram de 1 a 64 mg/L e os valores de CIM50 e CIM90, e a concentração necessária para inibir 50% e 90% dos isolados, foram respectivamente de 8 e 16mg/L. Observou-se CIM elevadas (>8mg/L) para 74% dos...