Genes candidatos às anomalias dentárias em pacientes portadores de maloclusão esquelética / Candidate genes for dental anomalies in patients skeletal malocclusion

RESUMO

O objetivo do presente estudo foi verificar a presença de associação fenótipo-genotípico entre TGFA (Fator de Crescimento Transformante α) (C/T rs1523305), IRF6 (Fator Regulatório Interferon 6) (A/C rs2013162) e MSX1 (Segmento Muscular Homeobox 1) (A/G rs12532) e anomalias dentárias em pacientes com malclusão esquelética. Para tanto, dois estudos prévios foram realizados com os objetivos de (I) determinar se indivíduos com discrepâncias esqueléticas de Classe II ou III apresentam uma maior frequência de anomalias dentárias em comparação com indivíduos com maloclusão de Classe I e (II) comparar quatro diferentes métodos de coleta salivar e de células bucais [Expectoração da Saliva (1), Expectoração da Saliva com Estímulo Lingual (2), Raspagem com Escova Citológica (3) e Raspagem com Escova Citológica mais Expectoração da Saliva (4)] para extração de DNA genômico, avaliando sua concentração e pureza. Na revisão sistemática, foi realizada uma busca nas principais bases de dados da literatura científica médica eletrônica. Estudos observacionais foram selecionados se fossem mencionadas anomalias dentárias nos diferentes padrões de maloclusão esquelética. Foi adotado um conjunto de critérios para elegibilidade do estudo, com base na estratégia PECOS (População maxila e mandíbula; Exposição discrepâncias esqueléticas; Comparação padrão de normalidade; e Resultado: anomalias dentárias). Cinco estudos retrospectivos contendo 7679 participantes foram classificados e considerados elegíveis para a revisão sistemática. A amostra do estudo II foi composta por 20 participantes. As coletas foram realizadas com intervalo de no mínimo um dia entre elas e foram armazenadas a -20°C até a extração do DNA ser realizada (Qiagen®). O estudo III foi composto por uma amostra de 505 registros ortodônticos. Dezenove pontos cefalométricos, serviram para a obtenção dos ângulos e medidas utilizados para a caracterização esquelética, utilizando-se o Software Dolphin. Amostras de saliva foram coletadas de todos os participantes e o DNA foi extraído, diluído e quantificado. Os genes TGFA, IRF6 e MSX1 foram usados para reações de PCR em tempo real. Os testes Razão de chance, Qui-quadrado, Exato de Fisher, T independente e coeficiente de correlação (nível de significância = 95%) foram realizados. A partir da revisão sistemática, concluiu-se que indivíduos com padrões de maloclusão esquelética têm mais anomalias dentárias. Após a análise estatística, não foi observado dimorfismo sexual em relação à concentração de DNA (p = 0,76), idade (p = 0,91) e etnias (p = 0,72). Não houve diferença significativa entre os métodos de coleta em relação à quantidade e pureza do DNA extraído (p≥0,05). O gene IRF6 foi associado com a ME Classe III (p = 0,04, OR = 0,69, IC 0,49-0,98) e o gene MSX1 foi associado ao padrão de crescimento hipodivergente (p=0,003, OR=0,5, IC 0,36-0,74) e ME Classe II (p=0,0001, OR=0,6, IC 0,46-0,78). Em relação a AD, o gene MSX1 também foi associado à impactação (p=0,03, OR=0,67, IC 0,47-0,96) e dilaceração (p=0,04, OR=0,27, IC 0,07-0,977). MSX1 associouse ao padrão de crescimento hipodivergente e Classe II, e impactação e dilaceração, mostrando que existe uma associação genética entre anomalias dentárias e maloclusões esqueléticas. (AU)

ABSTRACT

The objective of the present study was to verify the phenotype-genotype association between TGFA (Transforming Growth Factor α) (C/T rs1523305), IRF6 (Interferon Regulatory Factor 6) (A/C rs2013162) and MSX1 (Muscle Segment Homeobox 1) (A/G rs12532) and dental anomalies in patients with skeletal malocclusion. Two previous studies were carried out with the objective of (I) to determine if individuals with Class II or III skeletal discrepancies present a higher frequency of dental anomalies compared to individuals with Class I malocclusion and (II) to compare four different types of saliva and oral buccal cell collecting methods for genomic DNA extraction (1)Expectoration of saliva, (2)Expectoration of saliva with lingual stimulation, (3)Scraping with cytological brush, and (4)Scraping with cytological brush and expectoration of saliva, evaluating its concentration and purity. In the systematic review, a search of the main electronic medical scientific literature databases was conducted. Observational studies were selected if mentioning dental anomalies in the different skeletal malocclusion patterns. A set of criteria for the eligibility of the study was adopted, based on the PECOS strategy (Population maxilla and mandible, Exposure skeletal discrepancies, Comparison normality pattern, and Outcome: dental anomalies). Five retrospective studies containing 7679 participants were classified and considered eligible for the systematic review. The sample of study II was composed by 20 participants. The biological samples were collected at intervals of at least one day between them and were stored at -20 ° C until DNA extraction was performed (Qiagen®). Study III was composed of a sample of 505 orthodontic records. Nineteen cephalometric points were used to obtain the angles and measurements used for the skeletal characterization, using Dolphin Software. Saliva samples were collected from all participants and the DNA was extracted, diluted and quantified. The TGFA, IRF6 and MSX1 genes were used for real-time PCR reactions. The odds ratio, chi-square, Fisher's exact, independent T and correlation coefficient (significance level = 95%) tests were performed. From the systematic review, it was concluded that individuals with skeletal malocclusion patterns have more dental anomalies. After the statistical analysis, no sexual dimorphism (p = 0.76), age (p = 0.91) and ethnicity (p = 0.72) was observed in relation to DNA concentration. There was no significant difference between the collection methods in relation to the amount and purity of the extracted DNA (p≥0.05). IRF6 was associated with Class III skeletal malocclusion (p=0.04, OR=0.69, C.I. 0.49-0.98), and MSX1 was associated with hypodivergent growth pattern (p=0.003, OR=0.5, 95% C.I. 0.36-0.74), and Class II skeletal malocclusion (p=0.0001, OR=0.6, C.I. 0.46-0.78). In regards to dental anomalies, MSX1 was also associated with tooth impaction (p=0.03, OR=0.67, 95% C.I. 0.47-0.96) and root dilaceration (p=0.04, OR=0.27, 95% C.I. 0.07-0.97). MSX1 was associated with both hypodivergent growth pattern and Class II skeletal malocclusion (p=0.0001), and tooth impaction (p=0.03) and root dilaceration (p=0.04), whereas IRF6 was associated with Class III skeletal malocclusion, (AU)

RESUMEN

El objetivo del presente estudio fue verificar la presencia de asociación fenotipo-genotípica entre TGFA (Factor de crecimiento transformante α) (C / T rs1523305), IRF6 (Factor regulador de interferón 6) (A / C rs2013162) y MSX1 (Segmento muscular 1 de Homeobox 1). ) (A / G rs12532) y anomalías dentales en pacientes con malclusión esquelética. Con este fin, se realizaron dos estudios previos para (I) determinar si las personas con discrepancias esqueléticas de Clase II o III tienen una mayor frecuencia de anomalías dentales en comparación con las personas con maloclusión de Clase I y (II) para comparar cuatro métodos diferentes. y colección de células salivales [Esputo de saliva (1), Estímulo lingual Saliva Esputo (2), Raspado con cepillo citológico (3) y Raspado con cepillo citológico más Esputo de saliva (4)] para extracción de ADN genómico , evaluando su concentración y pureza. En la revisión sistemática, buscamos en las principales bases de datos de la literatura científica médica electrónica. Se seleccionaron estudios de observación si se mencionaban anomalías dentales en los diferentes patrones de maloclusión esquelética. Se adoptó un conjunto de criterios para la elegibilidad del estudio, basado en la estrategia PECOS (Población maxilar y mandíbula; Exposición discrepancias esqueléticas; Comparación patrón de normalidad; y Resultado: anomalías dentales). Cinco estudios retrospectivos con 7679 participantes fueron clasificados y considerados elegibles para una revisión sistemática. La muestra del estudio II consistió en 20 participantes. Se tomaron muestras con al menos un día de diferencia y se almacenaron a -20 ° C hasta que se realizó la extracción de ADN (Qiagen®). El estudio III consistió en una muestra de 505 registros de ortodoncia. Diecinueve puntos cefalométricos se utilizaron para obtener los ángulos y las medidas utilizadas para la caracterización esquelética utilizando Dolphin Software. Se recogieron muestras de saliva de todos los participantes y se extrajo, diluyó y cuantificó el ADN. Los genes TGFA, IRF6 y MSX1 se usaron para reacciones de PCR en tiempo real. Se realizaron las pruebas de odds ratio, Chi-cuadrado, exacta de Fisher, T independiente y coeficiente de correlación (nivel de significancia = 95%). De la revisión sistemática, se concluyó que las personas con patrones de maloclusión esquelética tienen más anomalías dentales. Después del análisis estadístico, no se observó dimorfismo sexual en relación con la concentración de ADN (p = 0,76), la edad (p = 0,91) y el origen étnico (p = 0,72). No hubo diferencias significativas entre los métodos de recolección con respecto a la cantidad y pureza del ADN extraído (p≥0.05). El gen IRF6 se asoció con ME Clase III (p = 0.04, OR = 0.69, CI 0.49-0.98) y el gen MSX1 se asoció con el patrón de crecimiento hipodivergente (p = 0.003, OR = 0.5, CI 0.36-0.74) y EM Clase II (p = 0.0001, OR = 0.6, CI 0.46-0.78). Con respecto a AD, el gen MSX1 también se asoció con impactación (p = 0.03, OR = 0.67, CI 0.47-0.96) y laceración (p = 0.04, OR = 0.27, IC 0,07-0,977). MSX1 se asoció con un patrón de crecimiento hipodivergente y de Clase II, impactación y laceración, lo que demuestra que existe una asociación genética entre las anomalías dentales y las maloclusiones esqueléticas. (AU)