Avaliação por imunoistoquímica da expressão de fatores de crescimento e de fatores relacionados à inflamação em câncer de mama triplo-negativo / Immunohistochemical evaluation of the expression of growth factors and inflammation-related factors in triple-negative breast cancer

RESUMO

O câncer de mama é uma doença heterogênea, sendo considerado um problema de saúde pública, ocupando o segundo lugar em incidência em todo o mundo, com um milhão de novos casos diagnosticados, levando a óbito 400.000 mulheres anualmente. Após incorporação clínica da avaliação dos receptores hormonais, bem como do estudo da amplificação do Receptor de Crescimento Epidérmico 2 - ERBB2, os tumores classificados por triplo-negativo (TN), por seu peculiar padrão de agressividade passaram a despertar maior interesse. Dentre os TN tornaram-se necessárias a definição e a diferenciação dos subtipos basal e não-basal. No presente trabalho foi realizado estudo imunoistoquímico, após confecção de tissue microarray (TMA) de 74 amostras de tumores TN oriundas do Instituto do Câncer do Ceará - ICC, e seguindo critérios mais aceitos pela literatura, classificados em basais e não-basais. Foram estudados e comparados os seguintes marcadores Receptor de crescimento epidérmico (EGFR), Citoqueratina5 (CK5), Citoqueratina14 (CK14), p63, Fator de crescimento epidérmico (EGF), Fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF), Receptor alfa do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFRA), Receptor beta do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFRB), Fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF), Receptor de fator de crescimento do endotélio vascular (VEGFR). Fator de crescimento de fibroblastos (FGF2), Receptor de fator de crescimento de fibroblastos (FGFR2), Ciclo-oxigenase2 (COX2), Óxido nítricosintase2 (NOS2), Interleucina 1beta (IL-1ß) e Toll like repceptor9 (TLR9). Foi encontrada significância estatística (p < 0,05) quando confrontados os dois subgrupos (basal x não-basal) e a imunomarcação de PDGF e PDGFRA, os quais foram encontrados com maior frequência no subgrupo basal. Foi encontrada significância estatística (p < 0,05) no estudo comparativo da COX2, com maior frequência de imunomarcação nos tumores basais. A NOS2 também apresentou significância estatística (p< 0,05), porém sua positividade esteve relacionada ao fenótipo não-basal. Foram avaliados também diversos variáveis como idade, raça, estadiamento clínico, estadiamento patológico, tratamento realizado (cirurgia, quimioterapia, radioterapia), e resposta clínica e patológica ao tratamento neoadjuvante, sem que se tenha encontrado diferenças estatísticas ao se comparar os dois subgrupos. Igualmente, o Intervalo livre de doença nestes subgrupos não foi estatisticamente diferente. Ao ser ajustada por idade, as pacientes até 50 anos, portadoras de tumores basais, diferente daquelas acima de 50 anos, apresentaram, na análise das curvas de Kaplan-Meyer, uma pior sobrevida quando comparadas com aquelas portadoras de tumores não-basais. Ficou evidenciada a pior sobrevida das pacientes jovens portadoras de tumores basais. Foi encontrada pior sobrevida nas pacientes que apresentaram imunomarcação positiva para p63 e VEGFR. Os dados aqui apresentados sugerem um potencial papel para PDGF e PDGFRA na caracterização dos tumores TN basais, e como potenciais alvos terapêuticos.

ABSTRACT

Breast cancer is a heterogeneous disorder. A public health concern, it is the second most common type of cancer in the world, with a million new cases diagnosed and 400,000 deaths annually. Since the evaluation of hormonal receptors and Human epidermal factor receptor ­ HER2 (ERBB2) amplification became routine clinical practice, more attention has been given to the occurrence of triple-negative tumors due to their particular aggressiveness. Triple-negative tumors may be differentiated into basal and non-basal. In this study a tissue microarray of 74 samples of triplenegative tumors from the Ceará Cancer Hospital were submitted to standard immunohistochemistry for identification of the basal and non-basal subtypes. The markers Epidermal growth factor receptor (EGFR), Cytokeratin 5 (CK5), Cytokeratin (CK14), p63, Epidermal growth factor (EGF), Platelet- derived growth factor (PDGF), Platelet derived growth factor receptor alfa (PDGFRA), Platelet derived growth receptor factor beta (PDGFRB), Vascular endolethelial growth factor (VEGF), Vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR), Fibroblastic growth factor 2 (FGF2), Fibroblastic growth factor receptor 2 (FGFR2), Cyclooxygenase-2 (COX2), Nitric oxid synthase 2 (NOS2), Interleukin-1 beta (IL-1ß) and Toll like receptor 9 (TLR9) were quantified and compared. The subgroups (basal vs. non-basal) differed significantly (p<0.05). The markers PDGF, PDGFRA and COX2 were significantly more frequently observed among basal tumors (p<0.05), while NOS2 was significantly more common among non-basal tumors (p<0.05). No statistically significant differences were observed between the subgroups with regard to the parameters of age, race, clinical stage, pathological stage, treatment received (surgery, chemo- or radiotherapy), disease-free interval and clinical or pathological response to neo-adjuvant treatment. The survival of patients under 50 years of age was shorter for basal than for non-basal tumors. Young patients with basal tumors had the shortest survival in the sample. The presence of the markers p63 and VEGFR was associated with shorter survival. Our results indicate a potential role for PDGF and PDGFRA in the identification of triple-negative tumors of the basal type and as potential therapeutic targets.