Detecção de DNA tumoral em câncer gástrico e a avaliação de sua utilidade no contexto de biópsias líquidas / Detection of tumor DNA in gastric cancer and evaluation of its usefulness in the context of liquid biopsies

RESUMO

Altas taxas de mortalidade são características dos adenocarcinomas gástricos (ADGs), especialmente pela ausência de sintomas específicos e pelos achados clínicos mais relevantes se manifestarem apenas na doença avançada. As biópsias que permitem o diagnóstico são coletadas a partir da lesão durante o exame endoscópico, mas nem sempre permitem uma adequada representação da heterogeneidade tumoral dos ADGs. Assim, a detecção de DNA tumoral em fluídos corporais é promissora por ter potencial de representar a carga mutacional tumoral de modo mais amplo. Neste trabalho usamos mutações em TP53 como marcadores da presença de DNA tumoral, investigadas nas biópsias teciduais e em fluidos corporais lavado gástrico (LG) coletado na endoscopia e plasma de 46 pacientes. Para todos os casos obtivemos as três amostras antes de qualquer tratamento, e para a maioria (31/46) obtivemos amostras também após o tratamento cirúrgico e/ou quimioterápico. Detectamos TP53 mutado nas biópsias de 15/46 (32,6%) pacientes; essas mesmas mutações foram encontradas em LG para 7/13 (53,9%) casos e no plasma em 6/15 (40%) casos. No LG encontramos 4 mutações ausentes na biópsia, sugerindo heterogeneidade tumoral. A análise combinada de LG e plasma permitiu a detecção de DNA tumoral em 9/15 (60%) casos. Ao ampliarmos o número de genes avaliados, conseguimos observar mais mutações marcadoras, reforçando o valor de ampliar esta abordagem. Embora mais estudos sejam necessários, nossos dados indicam que o LG é relevante na detecção de mutação em ADGs e que o monitoramento de mutações pode ter valor em análises de prognóstico e resposta ao tratamento.

ABSTRACT

High mortality rates are characteristic of gastric adenocarcinomas (GAC), especially due to late diagnosis, since the most relevant symptoms and clinical findings manifest only in advanced disease. Diagnosis is made by incisional biopsy, collected during endoscopy exam. Although this procedure may allow diagnosis in the majority of the cases, it may be inadequate for characterization of tumor genetic heterogeneity. Therefore, tumor DNA detection in body fluids would be a promising approach to characterize tumor mutational load comprehensively. In this work, we used TP53 mutations, found in GAC biopsies, as markers for the presence of tumor DNA in body fluids, represented by gastric washes (GW), collected in endoscopy exam, and plasma of 46 patients. Tumor biopsy, GW and plasma were collected from these 46 patients prior to any treatment, and also after surgery and/or chemotherapy for most of them (31/46). We detected TP53 mutations in 15/46 (32.6%) biopsies; 7 out 13 (53.9%) patients showed the correspondent TP53 mutation in GW and 6 out 15 (40%) cases in plasma. Four TP53 mutations were detected in GW but were absent in tumor biopsy, suggesting tumor heterogeneity. Combining mutation detection results from GW and plasma allowed the detection of tumor DNA in 9 out of 15 (60%) cases. When we increased the number of genes evaluated, we observed more marker mutations, reinforcing the value of extending this approach. Although further study is needed, our data indicate that GW are relevant in mutation detection in GAC, which may be useful for monitoring the presence of mutations that may have prognostic value and determine response to treatment.