Resposta imunoinflamatória na periodontite experimental induzida em ratos submetidos à quimioterapia e a dose oncológica de zoledronato / Immunoinflammatory response of the experimental periodontitis induced in rats subjected to chemotherapy and anticancer dose of zoledronic acid

RESUMO

O objetivo do presente estudo é avaliar os efeitos da quimioterapia com Cisplatina (CIS) combinado ao uso de Zoledronato (ZOL) sobre os tecidos periodontais saudáveis e na progressão da periodontite experimental induzida em ratos. Foram utilizados 160 ratos machos, distribuídos em dois grupos sem periodontite experimental induzida (SPE) e com periodontite experimental induzida (PE) e subdivididos em quatro subgrupos SS/SS receberam duas injeções de 0,5 mL de solução salina a 0.9% (SS) (n= 20); SS/ZOL receberam uma injeção 0,5 mL de SS e uma injeção de 100 µg/kg de ZOL diluído 0,45 mL em SS (n= 20); CIS/SS receberam uma injeção de CIS (5mg/kg) e outra injeção de 0,5 mL de SS (n= 20); CIS/ZOL receberam uma injeção de CIS (5mg/kg) e uma injeção de 100 µg/kg de ZOL diluído 0,45 ml em SS (n= 20). A administação ocorreu por via intraperitoneal em um intervalo de três dias, durante oito semanas. Na quarta semana, foi realizado a indução da PE no primeiro molar inferior esquerdo. Nos períodos de 14 e 28 dias após indução da PE, os animais foram eutanasiados pela administração de dose letal de thiopental (150mg/kg). As mandíbulas obtidas foram fixadas em formaldeído tamponado 4%, descalcificadas em EDTA e incluídas em parafina para confecção de cortes histológicos seriados de 4 µm de espessura para coloração com Hematoxilina e Eosina e realização de reações imunoistoquímicas. Foi realizado análise histológica (escores), histométrica de porcentagem de osso na furca (POF), porcentagem de osso necrosado (PON) e padrões de imunomarcação para TNFα, IL-1ß e TRAP. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (p<0,05) em programa computacional especializado. Foi observado diminuição do espaço do ligamento periodontal (aos 28 dias) e maior PON (aos 14 e 28 dias) em SPE-SS/ZOL e SPE-CIS/ZOL comparado a SPE-SS/SS e SPE-CIS/SS. Houve menor perda óssea e maior PON em PE-SS/ZOL e PECIS/ZOL comparado a PE-SS/SS e PE-CIS/SS aos 14 e 28 dias. Dentro dos limites do presente estudo, pode-se concluir que o uso combinado de CIS e ZOL é potencial fator de risco para desenvolvimento da osteonecrose dos maxilares, tanto em periodonto saudável quanto em periodonto acometido pela PE(AU)

ABSTRACT

The objective of the present research was to evaluate the effects of Cisplatin (CIS) chemotherapy combined with zoledronic acid (ZOL) on healthy periodontal tissues and on the progression of experimental periodontitis induced in rats. Were used 160 male rats, divided into two groups, either without induction of experimental periodontitis (NEP) or with induction of experimental periodontitis (EP), and subdivided into 4 subgroups SS/SS received two injections of 0.5 mL of saline solution 0.9% (SS) (n=20); SS/ZOL received one injection of SS and one injection of 100 µg/kg of ZOL solved in 0.45 mL of SS (n=20); CIS/SS received one injection of CIS (5mg/kg) and one injection of 0.5 mL of SS (n=20); CIS/ZOL received one injection of CIS (5mg/kg) and one injection of 100 µg/kg of ZOL solved in 0.45 mL of SS (n=20). The drugs/SS were administered via intraperitoneal at 3 days interval, during 8 weeks. On the fouth week, EP was induced in the left mandibular first molar. At 14 and 28 days efter EP induction, the animals were euthanized by lethal dose of sodium thiopental (150mg/kg). The collected mandibles were fixed in buffered 4% formaldehyde solution, demineralized in EDTA and embedded in paraffin for obtention of 4 µm thick semi-serial sections. Then, were submitted to Hematoxylin and Eosin staining and immunohistochemistry. Was performed the following analysis: histologic (scores), histometric of the percentage of bone in the furcation (PBF) and percentage of necrotic bone (PNB), and immunolabelling patter for TNFα, IL-1ß and TRAP. The collected data were submitted to statistical analysis (p<0,05) using an appropriate computer software. Was observed reduction in the periodontal ligament space (at 28 days) and increased PNB (at 14 and 28 days) in NEP-SS/ZOL and NEP-CIS/ZOL when compared with NEP-SS/SS and NEPCIS/SS. Less bone loss and higher PBF was observed in EP-SS/ZOL and EP-CIS/ZOL when compared with EP-SS/SS and EP-CIS/SS at 14 and 28 days. Within the limits of the present research, it can be concluded that combined use of CIS and ZOL is a potential risk factor for the development of medication related osteonecrosis of the jaw both in healthy periodontium and periodontium affected by EP(AU)