Valor prognóstico de phosS6 e modulação da via mTOR em produtos decistectomia / phosS6 prognostic value and mTOR pathway modulation in cystectomy specimens

RESUMO

Introdução: O carcinoma urotelial da bexiga é uma doença de alta incidência e letalidade. Em tumores avançados, há indicação de quimioterapia com agentes convencionais, porém a sobrevida global em 5 anos não excede 15%. A via mTOR é essencial para vários processos celulares, incluindo metabolismo, proliferação, angiogênese e diferenciação celular, e, estando alterada em mais de 40% dos tumores uroteliais, representa uma opção atraente para inibição farmacológica. No entanto, até o momento, os ensaios clínicos não têm desempenhado de forma satisfatória, o que se atribui à falta de critérios robustos para definição terapêutica e a particularidades de sua patogênese, as quais incluem retroalimentações da própria via, desta com outras vias essenciais e regulações pós-transcricionais críticas. Metodologia: Analisamos a expressão proteica (imunoistoquímica, n=101) e gênica (RT-PCR, n=78) de diversos componentes da via mTOR e de suas principais vias interativas (via induzida por hipóxia e ciclo celular), assim como o perfil de expressão de miRNAs (n=72), em amostras neoplásicas e não-neoplásicas obtidas de pacientes submetidos a cistectomia. A expressão proteica e gênica dos tumores foi quantificada em relação às de amostras não-neoplásicas, enquanto a interação entre genes e entre proteínas foi avaliada através de análise dendrológica. Para a análise das relações entre expressão proteica e gênica, a expressão proteica foi categorizada por meio de análise por cluster seguida de curva ROC e a expressão gênica foi transformada em escore através de lógica fuzzy. Os valores de expressão de miRNAs foram comparados por teste t, partindo das categorias criadas para phosS6 (Ser 235/236), seguido-se de análise por cluster...

ABSTRACT

Introduction: Urothelial carcinoma of the bladder is highly incident and lethal. In advanced disease, conventional chemotherapy may be applied, but overall 5-year survival does not exceed 15%. The mTOR pathway is essential to many cellular processes, including metabolism, proliferation, angiogenesis and cell differentiation and, since it is altered in > 40% of urothelial tumors, it represents an attractive target for pharmacological inhibition. However, clinical trials have not yielded exciting results, which is attributed to the lack of robust criteria for therapeutic definition and particularities of its pathogenesis, represented by feedback mechanisms along the pathway itself and with other essential pathways, as well as critical posttranscriptional regulation steps. Methods: Protein and gene expression of mTOR pathway members and its interacting pathway components (hypoxia-inducible pathway and cell cycle) were analyzed by IHC (n=101), RT-PCR (n=78) and miRNA profiling (n=72), in neoplastic and non-neoplastic samples obtained from patients submitted to cystectomy. Gene and protein expression were quantified relatively to non-neoplastic urothelial tissue and interaction between the genes and between the proteins was analyzed using dendrograms...