Aplicación de una cámara de flujo para el análisis de la aglutinación eritrocitaria mediada por anticuerpos monoclonales / Application of the flow chamber technique to the analysis of the erythrocyte agglutination mediated by monoclonal antibodies

ABSTRACT

El conocimiento de la energía involucrada en las interacciones célula-célula tiene importantes implicaciones en las ciencias biológicas y médicas. Los glóbulos rojos se adhieren entre si cuando macromoléculas específicas o no específicas (aglutininas) enlazan células adyacentes de manera irreversible o reversible. La técnica de la cámara de flujo fue utilizada para evaluar la afinidad de un anticuerpo monoclonal analizando la disociación de un doblete (dos células aglutinadas por el anticuerpo) determinando la energía de adhesión. Esta técnica permite aplicar una tensión de corte uniforme paralela a la interfase de adhesión de un aglutinado de dos células fijado sobre la superficie inferior de un microcanal. La tensión produce el desprendimiento progresivo de la célula superior del doblete. La observación microscópica de la separación producida en el aglutinado aislado y la obtención de imágenes secuenciales con una cámara CCD (Charged Coupled Device), permite determinar la relación entre la tensión de corte aplicada (sigma) y el porcentaje de separación de las células del doblete. A partir de estos resultados calculamos la energía de disociación por unidad de área membranal adherida(gamma d), valor igual a 8.92 x 10 elevado a -19 N.cm por moléculas de anticuerpo. Del análisis de los resultados, se concluye que la tensión de corte necesaria para disociar el doblete es proporcional a la densidad superficial de moléculas de anticuerpo y a la densidad antigénica de los eritrocitos. (AU)