Determinación temprana del sexo fetal en plasma materno mediante PCR en tiempo real / Early fetal sex determination in maternal plasma by real-time PCR / DeterminaþÒo precoce do sexo fetal em plasma materno por PCR em tempo real

RESUMEN

El análisis de ADN fetal libre en plasma materno permite estudiar material genético del feto sin realizar procedimientos invasivos sobre el embarazo. La identificación del sexo fetal mediante la detección de ADN del cromosoma masculino Y, en el plasma de mujeres embarazadas, es de gran utilidad en embarazos con riesgo para hiperplasia suprarrenal congénita o para enfermedades ligadas al cromosoma X. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la factibilidad y desempeño diagnóstico de la determinación del sexo fetal a través del análisis por PCR en tiempo real de ADN fetal libre en plasma de embarazadas. Se extrajeron 10 mL de sangre periférica a 134 pacientes embarazadas entre las semanas 5 y 32 de gestación, se separó el plasma y se efectuó extracción de ADN. Las muestras se analizaron mediante PCR en tiempo real amplificando el marcador DYS14 presente en el cromosoma Y. El sexo fetal se confirmó mediante ecografía realizada entre las semanas 20 y 32. La sensibilidad y especificidad de la técnica para detectar el sexo fetal fue del 98,5% y del 80,7% respectivamente. La menor edad gestacional de diagnóstico fue 5 semanas. La técnica implementada ha mostrado un desempeño diagnóstico similar al descripto en la bibliografía.(AU)

ABSTRACT

Free fetal DNA analysis in maternal plasma permits the study of fetal genetic material without performing invasive procedures at pregnancy. The identification of fetal sex by detecting the male Y chromosome DNA in the plasma of pregnant women is very useful in pregnancies at risk for congenital adrenal hyperplasia or X-linked diseases. The present study aimed at evaluating the feasibility and the diagnostic performance of the determination of fetal sex analyzing free fetal DNA by real-time PCR in maternal plasma. A total of 10 mL of peripheral blood was taken from 134 pregnant patients undergoing between 5 and 32 weeks of gestation; the plasma was separated and DNA extraction was performed. Samples were analyzed by real-time PCR amplifying the marker DYS14 present in the Y chromosome. Fetal sex was confirmed by ultrasound performed between weeks 20 and 32. Sensitivity and specificity of the technique to detect the fetal sex were 98.5% and 80.7% respectively. The earliest gestational age at diagnosis was 5 weeks. The implemented technique has shown similar diagnostic performance to that described in the literature.(AU)

RESUMO

A análise do DNA fetal livre no plasma materno permite o estudo do material genético fetal sem a realizaþÒo de procedimentos invasivos na gravidez. A identificaþÒo do sexo fetal através da detecþÒo do DNA do cromossomo masculino Y, no plasma de mulheres grávidas, é muito útil em gestaþ§es com risco de hiperplasia adrenal congÛnita ou para doenþas ligadas ao cromossomo X. O presente estudo teve como objetivo avaliar a factibilidade e desempenho diagnóstico da determinaþÒo do sexo fetal através da análise por PCR em tempo real de DNA fetal livre no plasma de grávidas. 10 mL de sangue periférico foi extraído a partir de 134 pacientes grávidas entre 5 e 32 semanas de gestaþÒo, o plasma foi separado e foi feita a extraþÒo de DNA. As amostras foram analisadas por PCR em tempo real amplificando marcador de DYS14 presente no cromossomo Y. O sexo fetal foi confirmado por ultrassonografia realizada entre as semanas 20 e 32. A sensibilidade e a especificidade da técnica para detectar o sexo fetal foram de 98,5% e 80,7%, respectivamente. A menor idade gestacional de diagnóstico foi de 5 semanas. A técnica utilizada demonstrou um desempenho de diagnóstico semelhante ao descrito na literatura.(AU)