Desenvolvimento de inibidores peptídicos para serino proteinases da coagulação sanguínea humana

RESUMO

A coagulação sanguínea, considerada por muito tempo dependente somente de plaquetas e enzimas denominadas fatores de coagulação, atualmente é vista como um sistema altamente regulado, equilibrado e multifacetado, constituído tanto por componentes moleculares quanto celulares e é dividida em três fases que se sobrepõem entre si iniciação (exposição do plasma em uma lesão endotelial), amplificação (adesão e ativação de mais plaquetas e ativação dos fatores V, VIII e XI) e propagação (formação dos complexos tenases e protrombinase). Após entendimento do mecanismo dos fatores de coagulação, diversos estudos estão sendo desenvolvidos a fim de, produzir fármacos com funções anticoagulantes. Já se é sabido que inibidores de proteinases provenientes de glândulas salivares de animais hemátofogos e de origem vegetal, principalmente do gênero Bauhinia – objeto de estudo do presente trabalho – têm sido amplamente estudados e constituem uma importante classe de moléculas biologicamente ativas com resultados promissores. Visto que ainda não há um anticoagulante ideal e que os inibidores de proteinases isolados do gênero Bauhinia, podem ser usados em estudos de interação enzima-substrato e como potenciais novos fármacos, o presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de inibidores peptídicos para serino proteinases da coagulação sanguínea humana. Desenho, síntese, purificação e identificação dos peptídeos 1A e 1B foram baseados no sítio reativo do inibidor de fator Xa (BuXI) e do inibidor de tripsina (BvTI), respectivamente. Nos ensaios de inibição enzimática, os peptídeos 1A e 1B foram avaliados quanto à eficácia na inibição do fator Xa humano, apenas o peptídeo 1A inibiu 20% a atividade dessa serino proteinase central da cascata da coagulação sanguínea humana. Modificações na sequência peptídica proporcionaram melhoria na associação desses peptídeos à enzima alvo, afetando de maneira efetiva a atividade catalítica da mesma. E também foi utilizado o programa protparam para características químicas dos peptídeos sintéticos.