Caracterización de aislamientos clínicos de Leptospira para su uso en vacunas veterinarias / Characterization of clinical isolates of Leptospira for veterinary vaccines

RESUMEN

Uno de los criterios más importantes para el desarrollo de inmunógenos de Leptospira es contar con cepas bien caracterizadas por su virulencia y representativa de los serogrupos circulantes desde el punto de vista clínico y veterinario. Todo lo cual permite garantizar inmunógenos capaces de proteger contra los serovares presente en la formulación y que afectan a los animales en riesgo. Este trabajo se realizó a partir de aislamientos del agente causal de cinco casos clínicos autóctonos de Leptospira en la provincia de Holguín, Cuba, mediante métodos convencionales crecimiento a 13ºC, medio suplementado con 8-azaguanina y en presencia de cloruro de sodio. Además, los aislamientos se clasificaron hasta nivel de serogrupo mediante la técnica de microaglutinación. A partir de estos aislamientos fue seleccionada y caracterizada una cepa del serogrupo Ballum como candidato vacunal. Los aislamientos no mostraron crecimiento a 13ºC, ni cuando se le añadió al medio 8-azaguanina (2,25 mg/mL), mientras que todas las cepas mostraron conversión a forma esférica en presencia de cloruro de sodio (1M). La clasificación de los aislamientos permitió disponer de dos cepas pertenecientes al serogrupo Ballum y dos a Pomona. La cepa seleccionada mostró alta virulencia y patogenicidad en el biomodelo Hámster Sirio, además de buena estabilidad en los medios de cultivos. Su clasificación hasta el nivel de serovar mediante el uso de anticuerpos monoclonales determinó su pertenencia al serovar Ballum. El presente trabajo, por primera vez, sienta las bases para formulaciones vacunales novedosas en animales, conteniendo el serogrupo Ballum(AU)

ABSTRACT

One of the most important approaches for the development of Leptospira immunogens is to have very well characterized strains by their virulence and which are representative of the circulating serogroups from the clinical and veterinarian point of view. All of this allows to guarantee immunogens capable to protect against the serovars present in the formulation and that affect animals at risk. This paper was carried out from isolations of the causal agent of five autochthonous clinical cases of Leptospira at HolguÝn, by means of phenotypic conventional methods: growth at 13ºC, in supplemented media with 8-azaguanina and in the presence of sodium chloride. The isolations were also classified until serogroup level by the microaglutination technique. A strain of Ballum serogroup was selected and characterized from these isolations as a vaccinal candidate. The isolations did not show growth at 13ºC, not even when 8-azaguanina (2.25 mg/mL) was added to the culture, while all the strains showed conversion to spherical form in the presence of sodium chloride (1M). The classification of the isolations allowed having two strains belonging to the serogroup Ballum and two to Pomona. The selected strain showed high virulence and pathogenicity in the Syrian Hamster bio model, as well as a good stability in the culture media. Its classification until the serovar level by means of the use of monoclonal antibodies determined that it belonged to the Ballum serovar. The present paper sets for the first-time the bases for novel vaccinal formulations in animals, containing the serogroup Ballum(AU)