Radioinmunoensayo de dihidrotestosterona. Validación del método y valores normales / Dihydrotosterona (DHT) radioimmunoassay. Validation of the method and normal valves

ABSTRACT

Se determinaron por radioinmunoensayo los niveles plasmáticos de DHT de 20 mujeres y 40 hombres sanos entre 20 y 45 años de edad. Se añadió DHT (2 000 dpm) como estándar interno a cada muestra y el plasma fue extraído por 2 veces con dietil éter. Los extractos etéreos fueron purificados en microcolumnas cromatográficas con sephadex LH-20, utilizando como sistema de solvente tolueno/metanol 91. Los estándares (25-800pg/ml) y alícuotas de 500 ul de las muestras por duplicado fueron procesados con antisuero antiestosterona (14 por ciento de reacción cruzadas con DHT) y DHT tritiada (20 000 dpm). La separación de los esteroides libres se realizó con una mezcla de carbón dextrán. El mínimo valor que pudo ser determinado fue de 5 pg/ml. La concentración (XñDS) de DHT en muestras de plasma del grupo de hombres fue de 0,64 ñ 0,23 ng/ml. Para la mujer la concentración obtenida fue (XñDS) de 0,15 ñ 0,10 ng/ml para los experimentos de repetibilidad y reproducibilidad los CV obtenidos fueron de 9,4 por ciento y 15,9 por ciento . Se obtuvo linealidad y paralelismo de la curva de dilución de las muestras con respecto a la curva estándar (AU)