Transformación eficiente de Agrobacterium tumefaciens con ADN plásmídico por electroporación / High-efficiency transformation of agrobacterium tumefaciens with plasmid DNA by electroporation

ABSTRACT

Se describe un método simple y altamente eficiente para transformar directamente Agrobacterium tumefaciens con ADN plasmídico. El protocolo se basa en la electropermeabilización de la pared celular bajo la acción de un campo electrico de alto voltaje y se obtienen resultados reproducibles transformantes por microgramo de ADN plasmídico. Usualmente, la electroporación se realiza en una solución de polietilén-glicol al 15 % y una magnitud del campo eléctrico de 12.5 kV/cm. La utilidad de este método de transformación es demostrada mediante el establecimiento de una genoteca de Arabidopsis thaliana directamente en Agrobacterium tumefaciens. Nuestros resultados ofrecen interesantes perspectivas para la transferencia de bancos de genes y la complementación génica en plantas prescindiendo del uso de Escherichia coli como hospedero intermediario (AU)