Regulación de la expresión de caveolina-1 en macrófagos por agonistas PPAR / Regulation of caveolin-1 expression in macrophages by PPAR agonists

RESUMEN

Introducción. La activación o la sobreexpresión del receptor activado por proliferadores peroxisómicos * (PPAR*) induce la expresión de caveolina-1 en diferentes tipos celulares. El objetivo de este estudio ha sido evaluar si los agonistas PPAR regulan la expresión de la caveolina-1 en macrófagos, y explorar los posibles mecanismos implicados. Material y métodos. Se diferenciaron monocitos THP-1 por exposición a PMA durante 24 h y, posteriormente, se trataron con rosiglitazona a diferentes dosis y durante distintos períodos. Los valores de ARNm se determinaron por la reacción de la transcriptasa inversa acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR), y la expresión de la proteína mediante western-blot. Resultados. El tratamiento con la rosiglitazona aumentó los valores de ARNm y de proteína de caveolina-1 de forma dependiente de la dosis y el tiempo en macrófagos THP-1. Esta inducción no se observó en presencia de inhibidores de la transcripción o de la síntesis de novo de proteínas. El incremento de la expresión de caveolina-1 producido por rosiglitazona no se relaciona con el estado de diferenciación celular y parece ser dependiente de la activación PPAR, ya que la presencia del antagonista PPAR GW9662 lo anuló por completo. Por último, se ha identificado un elemento de respuesta a proliferadores peroxisómicos (PPRE) funcional en el promotor del gen de la caveolina-1, que se activa por el tratamiento con rosiglitazona en macrófagos THP-1. Conclusiones. La rosiglitazona incrementa la expresión de caveolina-1 en macrófagos, a través de la activación de los PPAR y, probablemente, como consecuencia de la unión al PPRE identificado en la secuencia del promotor del gen de la caveolina-1 (AU)

ABSTRACT

Introduction. Peroxisome proliferator-activated receptor * (PPAR*) activation or overexpression induce caveolin-1 expression in several cell types. The aim of this study was to ascertain whether PPAR agonists could also regulate the caveolin-1 gene in macrophages, and to investigate the mechanisms involved. Materials and methods. PMA-treated THP-1 monocytes were incubated with rosiglitazone at different concentrations and for different periods of time. MRNA levels were determined by RT-PCR and protein expression by Western blot. Results. Our experiments demonstrated that rosiglitazone dose- and time-dependently increased caveolin-1 mRNA and protein in THP-1 macrophages. This induction was not observed in the presence of transcription inhibitors or de novo protein synthesis. We also showed that the increase in caveolin-1 elicited by rosiglitazone was not related to macrophage differentiation. This inductive effect seems to be dependent on PPAR activation, since the PPAR antagonist GW9662 abolished it. Finally, we identified a functional peroxisome proliferator response element (PPRE) in the caveolin-1 promoter, which was activated upon rosiglitazone treatment in THP-1 macrophages. Conclusions. PPAR activators, such as the PPAR* agonist rosiglitazone, increase caveolin-1 expression in macrophages. This effect appears to be mediated by PPAR activation, possibly by the binding of activated PPAR to the PPRE identified in the caveolin-1 promoter (AU)