Staphylococcus coagulasa negativos resistentes al linezolid: características fenotípicas, genotípicas y sensibilidad a combinaciones de antibióticos / Linezolid resistant coagulase-negative Staphylococcus: Phenotypical and genotypical characteristics and sensitivity to antibiotic combinations

RESUMEN

Objetivo Recuperamos 22 aislados de estafilococos coagulasa negativos resistentes al linezolid de nuestro hospital para su identificación, sensibilidad, perfil epidemiológico, mecanismos de la resistencia al linezolid y posibles combinaciones antibióticas sinérgicas. Métodos La identificación de los aislados fue realizada mediante espectrometría de masas (Vitek-MS, BioMérieux). La sensibilidad se realizó con el sistema Vitek-2 (bioMérieux) y el método de microdilución en caldo según las recomendaciones del CLSI. Se realizó electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE) para estudiar la relación genética de los aislados. Los mecanismos de la resistencia al linezolid fueron evaluados por PCR/secuenciación presencia del gen cfr, mutaciones puntuales en el dominio V del ARN ribosomal 23S y mutaciones ribosomales adicionales (en los genes rplC, rplD y rplV). La actividad in vitro del linezolid fue estudiada por separado y en combinación con otros 3 antibióticos utilizando tiras de E-test. Resultados Veinte aislados fueron identificados como Staphylococcus epidermidis y 2 como Staphylococcus hominis. La PFGE demostró que los aislados pertenecían a diferentes clones 21 de los aislados presentaron mutaciones en la región del dominio V del ARNr 23S y en el 54,5% fue encontrado el gen cfr. La administración previa de linezolid fue documentada en la mayor parte de casos. El linezolid en combinación con gentamicina mostró una actividad sinérgica en el 45,5% de los aislados. Conclusiones Staphylococcus epidermidis fue la especie de estafilococos coagulasa negativos resistentes al linezolid más frecuentes. Los valores de CMI fueron además elevados para otros antiestafilocócicos. Todas las cepas presentaron varios mecanismos de resistencia al linezolid. Nuestros datos sugieren que linezolid más gentamicina podría ser una combinación sinérgica frente a los estafilococos coagulasa negativos resistentes al linezolid(AU)

ABSTRACT

Objective We recovered 22 coagulase-negative staphylococci isolates in our hospital to study their identity, susceptibility, epidemiological profile, linezolid resistance mechanisms, and the possibilities of different antibiotic combinations. Methods Isolate identification was performed using mass spectrometry (Vitek-MS, bioMérieux). Susceptibility testing was carried out with the Vitek-2 system and the broth microdilution method according to CLSI guidelines. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) was performed to analyze the genetic relationship between isolates. Linezolid resistance mechanisms were evaluated by PCR/sequencing presence of cfr gene, point mutations in domain V of 23S ribosomal RNA and additional ribosomal mutations (in the rplC, rplD and rplV genes). The in vitro activity of linezolid was investigated alone and in combination with another three antibiotics acting on different cellular targets, using E-test strips. Results Twenty isolates were identified as Staphylococcus epidermidis, and 2 as Staphylococcus hominis. PFGE showed that isolates belonged to diverse clones, 21 of them presented mutations in the domain V region of 23S rRNA and the cfr gene was found in 54.5%. Prior administration of linezolid was documented in most of cases. Linezolid in combination with gentamicin showed a synergistic activity in 45.5% of isolates. Conclusions Staphylococcus epidermidis was the most prevalent linezolid-resistant coagulase-negative staphylococci. All isolates showed increased MIC values compared to other anti-staphylococcal drugs and several linezolid resistance mechanisms. Our data suggest that linezolid plus gentamicin could be a synergistic combination against linezolid-resistant coagulase-negative staphylococci(AU)