Análisis de la dinámica de la fragmentación de ADN en espermatozoides para la optimización de la Inseminación Artificial Intrauterina / Dynamic analysis of sperm DNA fragmentation for optimizing intrauterine artificial insemination

RESUMEN

Introducción y Objetivos: De forma normal existe un porcentaje de espermatozoides con ADN fragmentado en el eyaculado. Sin embargo, la manipulación de las muestras de semen para R.A. puede aumentar el grado basal de fragmentación. Aunque los mecanismos de procesamiento del semen que pueden afectar a la fragmentación no son todavía conocidos, el objetivo es analizar la influencia del swim-up en la dinámica de fragmentación del ADN espermático a lo largo del tiempo en las mismas condiciones en las que se procesa el semen para IAC, y evaluar si la fragmentación del ADN espermático tras swim-up, así como su evolución en el tiempo puede predecir la posibilidad de gestación en IAC. Material y métodos: Las muestras de semen utilizadas se han obtenido de 25 parejas en tratamiento de IAC el mismo día de la Inseminación. La fragmentación del ADN se midió con el Kit Halosperm (SCD). Se empleó la T de Student para la comparación estática de medias entre ambos grupos y tests de regresión lineal, exponencial y logarítmica para el estudio dinámico. Resultados: En todo momento, dentro del intervalo estudiado, el índice de fragmentación del semen capacitado se mantiene significativamente inferior al del semen fresco. Conclusiones: Los resultados apoyan la idea de que la centrifugación que conlleva el swim-up no induce daño adicional en el ADN espermático y que es recomendable utilizar las muestras de semen post swimup para inseminación en un intervalo de una hora (AU)

ABSTRACT

Introduction: A certain level of damaged DNA is present in mature sperm cells after a natural ejaculation. Additionally, sperm management for artificial reproduction techniques (ART) may increase the basal rate of DNA damage. Unfortunately, the mechanisms and processes involved in Sperm DNA Fragmentation (SDF) are not fully illuminated. The main aim of this investigation was to analyse the influence of swim-up on the evolution of sperm DNA fragmentation values over time, emulating the experiment within the same set-up of sperm handling as used for insemination and to evaluate whether the degree of sperm DNA fragmentation as well the evolution over time can predict IUI outcome. Material and methods: Semen samples were obtained from couples undergoing IUI (only one cycle per couple was included) for infertility treatment at the Clinica Tambre in Madrid, Spain. A total of 25 males provided 25 samples that were analysed. SDF fragmentation was assessed using the sperm chromatin dispersion (SCD) test using the Halosperm kit (Halotech DNA, Madrid). Statistical analysis was performed using T-Student and regression analysis . Results: Mean values of DNA fragmentation in the spermatozoa prepared by swim-up are lower than before selection in all times studied. Conclusion: The results of this study support the notion that the swim-up technique, as practised in our laboratory, does no induce DNA damage to human spermatozoa, as assessed by SCD assay. We therefore propose that sperm samples be used before an hour after processing in intrauterine insemination (AU)