Efectos de las técnicas de capacitación sobre la morfología espermática y los resultados de la inseminación intrauterina / Effects of techniques for sperm capacitation of sperm morphology and results of Intrauterine Insemination

RESUMEN

ANTECEDENTES La inseminación intrauterina (IIU) combinada con la hiperestimulación ovárica controlada es un tratamiento económico, sencillo, menos estresante e invasivo que otras técnicas de Reproducción Asistida. Su tasa de éxito tras varios ciclos, resulta similar a la obtenida con las técnicas más complejas y depende de varios factores, entre los que destacan la edad, el índice de masa corporal, el grosor endometrial, el número de folículos superiores a 16 mm, la calidad del semen utilizado, la morfología espermática y el tipo de esterilidad de causa femenina. Sin embargo, no existe un consenso sobre la medida en la que estos factores influyen en la probabilidad de conseguir embarazo en IIU. OBJETIVOS: Analizar la influencia de la morfología espermática sobre la tasa de gestación en IIU con el fin de recomendar la técnica de selección espermática más adecuada para la realización de la inseminación. Además, se pretende identificar los factores que predicen la obtención de gestación en IIU, con el fin de desarrollar un modelo de predicción de gestación basado tanto en las variables femeninas, como en las de la muestra de semen. Ámbito Estudio retrospectivo de cohortes de muestras de semen en el laboratorio de Andrología de la Unidad de Reproducción Humana Asistida del Hospital Universitari I Politécnic La Fe de Valencia desde Enero de 2013 hasta Abril de 2014. DISEÑO: Se analizaron 100 muestras de sémenes diagnósticos para ver la técnica de capacitación más adecuada y 120 muestras de IIU para identificar los factores predictores de gestación. MATERIAL Y MÉTODO: El estudio de los sémenes diagnósticos, incluyó la evaluación de variables macroscópicas, microscópicas y de la morfología mediante la tinción de Diff-quick y el sistema CASA. La preparación de las muestras de semen se realizó utilizando las técnicas de swim-up y gradientes de densidad. Tras finalizar el proceso de capacitación, se evaluó el recuento, motilidad, número total de espermatozoides móviles capacitados y morfología para ambas técnicas de selección espermática. El estudio de las muestras de semen destinadas a IIU, incluyó la evaluación de recuento, motilidad y morfología en fresco y tras el capacitado de la muestras mediante swim-up. Se evaluó la relación de variables asociadas a la mujer (edad, IMC, número de folículos mayores de 16 mm, causa de esterilidad, grosor endometrial) y al varón (causa de esterilidad, concentración, motilidad, morfología, número de espermatozoides móviles totales utilizados para inseminación, origen de la muestra) con la tasa de gestación en IIU RESULTADOS: Se analizaron un total de 100 muestras de sémenes diagnósticos, de los cuales el 52 % se correspondieron con varones normozoospérmicos y el 48 % con varones oligozoospérmicos. Además, se estudiaron un total de 120 ciclos de IIU con un total de 12 embarazos y 2 abortos, lo que supone una TG global por ciclo del 10% y una tasa de aborto del 1,7 %. Los resultados obtenidos demuestran que la morfología espermática se asocia a la esterilidad de causa masculina y que los gradientes de densidad permiten recuperar un porcentaje significativamente mayor de espermatozoides normales (p-valor=0,0000), aunque la morfología de la muestra capacitada no influye en la TG en IIU. Los criterios estrictos de Kruger y el sistema CASA no permiten predecir el éxito de la IIU y en el análisis de regresión logística realizado se ha podido observar que las variables femeninas grosor endometrial, número de folículos >16 mm y la variable seminal motilidad en capacitado aumentan la probabilidad de conseguir gestación en IIU. CONCLUSIONES: La técnica de selección espermática que permite recuperar un porcentaje significativamente mayor de espermatozoides morfológicamente normales son los gradientes de densidad. Sin embargo, se ha demostrado que la morfología espermática de la muestra de semen capacitada no influye en la TG en IIU. Además, los criterios estrictos de Kruger y el sistema CASA no permiten predecir el éxito de la IIU. Por último, se obtiene un modelo de predicción de gestación en IIU que dependería de las variables femeninas grosor endometrial y número de folículos mayores de 16 mm el día de la hCG, y de la variable motilidad de la muestra capacitada para la realización de la IIU

ABSTRACT

BACKGROUND: The combined intrauterine insemination (IUI) with controlled ovarian hyperstimulation is an inexpensive, simple, less stressful and less invasive treatment compared with other Assisted Reproduction Techniques (ART). Its success rate after several cycles, is similar to that obtained with the most sophisticated techniques and depends on several factors, among which are age, body mass index, endometrial thickness, the number of follicles over 16 mm, semen quality used, sperm morphology and type of female infertility cause. However, there is no consensus on the extent to which these factors influence the likelihood of achieving pregnancy in IUI. OBJECTIVES: The aim of this study is to analyze the influence of sperm morphology on IUI pregnancy rate (PR) to recommend the most appropriate sperm selection technique for performing insemination. Another objective is to relate the morphology parameters with concentration and motility fresh and capacitation semen samples, and identify factors that predict the positive or negative result of pregnancy through a gestation model based on female variables and semen sample characteristics. SETTING: Retrospective cohort study of semen samples in the laboratory of Andrology in the Assisted Human Reproduction Unit of the Hospital La Fe in Valencia, from January 2013 to April 2014. DESIGN: 100 semen diagnoses samples were studied to identify the most appropriate sperm selection technique and 120 samples of IUI to identify predictors of pregnancy MATERIAL AND METHOD: The study of semen diagnosis included evaluation of macroscopic and microscopic variables, and of morphology by Diff-quick and CASA system. The preparation of semen samples was performed using the swim-up techniques and density gradients. Count, motility, total number of motile sperm and morphology for both sperm selection techniques was evaluated after completing the capacitation. The study of semen samples intended for IUI, included evaluation of count, motility and morphology in fresh samples and after the samples capacitated by swim-up. The relationship of variables associated with women (age, BMI, number of follicles over 16 mm, cause of infertility, endometrial thickness) and with men (cause of infertility, concentration, motility, morphology, number of total motile sperm used, origin of the sample) was correlated with pregnancy rate after IUI. RESULTS: A total of 100 semen diagnosis samples were studied 52% corresponded to normozoospermic men and 48% corresponded to oligozoospermic men. In addition, a total of 120 cycles of IUI were studied; the outcome was 12 pregnancies and 2 miscarriages, which meant a pregnancy rate (PR) of 10% and a miscarriage rate of 1,7%. No multiple pregnancies were obtained and there was one ectopic pregnancy. The results show that sperm morphology is associated with male infertility causes and density gradients can retrieve a significantly higher percentage of normal spermatozoa (p-value=0,0000), although sperm morphology does not affect the IUI pregnancy rate. Kruger ́s strict criteria and the CASA system cannot predict IUI success and the logistic regression analysis performed showed that the endometrial thickness, number of follicles > 16 mm and sperm motility increase the likelihood of getting pregnant in IUI. CONCLUSIONS: The sperm selection technique that makes it possible to recover a significantly greater percentage of normal spermatozoa are density gradients. However, it has been demonstrated that sperm morphology of the capacitation semen samples does not affect IUI pregnancy rate. In addition, Kruger ́s strict criteria and the CASA system cannot predict IUI success. Lastly, a gestation prediction model for IUI is obtained that depends on the female variables endometrial thickness, number of follicles over 16 mm on the day of hCG and of the sperm motility to perform IUI