Analysis of biofilm production and expression of adhesion structures of circulating Clostridioides difficile strains from Mexico / Análisis de la producción de biopelícula y expresión de estructuras de adhesión de cepas circulantes de Clostridioides difficile en México

ABSTRACT

Introduction: Clostridioides difficile biofilms are believed to protect the pathogen from antibiotics, in addition to potentially contributing to recurrent infections. Methodology: Biofilm production of 102 C. difficile isolates was determined using the crystal violet staining technique, and detachment assays were performed. The expression levels of cwp84 and slpA genes were evaluated by real-time PCR on selected isolates. Results: More than 70% of isolates (75/102) were strong biofilm producers, and the highest detachment of biofilm was achieved with the proteinase K treatment (>90%). The overall mean expression of cwp84 was higher in RT027 than in RT001 (p=0.003); among strong biofilm-producing strains, the slpA expression was lower in RT027 than in RT001 (p<0.000). Conclusions: Proteins seem to have an important role in the biofilm's initial adherence and maturation. slpA and cwp84 are differentially expressed by C. difficile ribotype and biofilm production level.(AU)

RESUMEN

Introducción: Se cree que las biopelículas de Clostridioides difficile (C. difficile) protegen al patógeno de los antibióticos, además de contribuir potencialmente a las infecciones recurrentes. Metodología: Se determinó la producción de biopelículas de 102 aislados de C. difficile, mediante la técnica de tinción con violeta cristal y se realizaron ensayos de desprendimiento. Los niveles de expresión de los genes cwp84 y slpA se evaluaron mediante PCR en tiempo real en aislados seleccionados. Resultados: Más del 70% de los aislados (75/102) fueron fuertes productores de biopelículas y el mayor desprendimiento de biopelícula se logró con el tratamiento con proteinasa K (> 90%). La expresión media global de cwp84 fue mayor en RT027 que en RT001 (p = 0,003); entre las cepas productoras fuertes de biopelícula, la expresión de slpA fue menor en RT027 que en RT001 (p < 0,000). Conclusiones: Las proteínas parecen tener un papel importante en la adhesión y maduración inicial de las biopelículas; slpA y cwp84 se expresan de forma diferente según el ribotipo de C. difficile y el nivel de producción de biopelículas.(AU)