Caracterización molecular de células progenitoras del parénquima subcortical cerebral humano adulto / Molecular characterization of progenitor cells from subcortical parenchyma of adult human brain

RESUMEN

Objetivo: Caracterizar los patrones de expresión de marcadores de indiferenciación y diferenciación y las alteraciones morfológicas de las células progenitoras procedentes de parénquima cerebral humano adulto a lo largo de los pases en cultivo, evaluando su potencial para ser empleadas como fuente de progenitores de oligodendrocitos. Materiales y Métodos: Las células progenitoras se aislaron a partir de dos muestras obtenidas de pacientes sometidos a exéresis temporal por epilepsia. Para comprobar la evolución de los niveles de expresión de marcadores moleculares de diferenciación e indiferenciación en dichas células, se procedió a la extracción de ARNm en cada pase y a su estudio mediante RT-PCR. Se llevó a cabo un análisis de su capacidad proliferativa mediante inmunocitoquímica y un estudio de la evolución morfológica mediante microscopía. Resultados: Las células mostraron capacidad proliferativa durante los primeros pases en cultivo. Además, detectamos la expresión de marcadores de indiferenciación y diferenciación temprana a oligodendrocitos. Conclusión: Las células progenitoras aisladas de parénquima subcortical de cerebro humano pueden ser susceptibles de diferenciación a oligodendrocitos maduros, aunque en protocolos de diferenciación sólo deberían utilizarse pases tempranos (AU)

ABSTRACT

Objetive: characterize the behavior of progenitor cells isolated from subcortical parenchyma of human brain in culture. We have analyzed the changes in expression patterns of differentiation/undifferentiation markers as well as cell morphology along the passages and evaluated the potential to be further used as oligodendrocyte progenitors source. Material and Methods: We isolated progenitor cells from two different samples of subcortical parenchyma human brain of patients suffering from epilepsy. Cells were kept in culture until they became quiescent/senescent. Every other passages RNAs were isolated and checked for the expression of differentiation and undifferentiation markers by using RT-PCR. Proliferation was also addressed by RT-PCR and immunocytochemistry. We carried out cell morphology studies on semithin and ultrathin sections of cells. Results: We observed decreasing proliferative capacity of both two cell lines which became quiescent/senescent around passages 8-10. We detected the expression of either undifferentiation or early neural and oligodendrocytes differentiation markers. Conclusions: As for the expression of molecular markers, progenitor cells isolated from subcortical parenchyma of human brain have the potential to differentiate into mature oligodendrocytes (AU)