Criopreservaçäo de embriöes de camundongos em diferentes estágios de desenvolvimento utilizando metanol como crioprotetor / Criopreservation of mouse embryos in different stages of development using methanol as a cryoprotectant

RESUMO

O presente trabalho foi planejado para testar os diferentes estágios de desenvolvimento encontrados no quarto dia após injeçäo de HCG em camundongos superovulados, afetam as taxas de desenvolvimento dos embriöes, criopreservados em uma soluçäo 3M de metanol.Foram criopreservados embriöes nos estágios de 1) mórula, 2) blastocisto jovem (aqueles em que a cavidade ocupasse menos do que 50% do volume do embriäo), e 3) blastocisto (aqueles em que a cavidade ocupasse mais do que 50% do volume do embriäo). Os embriöes foram colocados diretamente numa soluçäo 3M de metanol em PBSS, a temperatura ambiente, durante 10 minutos, acondicionados em "paillets" de 0,25 ml, e colocados no aparelho de criopreservaçäo, diretamente, a 10§C. Após 5 minutos a essa temperatura, foi induzida a formaçäo de gelo. Uma vez transcorridos 6 minutos de equilíbrio, após a nucleaçäo a 10§C, os embriöes foram submetidos a queda de temperatura de 0,5§C, por minutos, até atingir a temperatura de 30§C, quando foram mergulhados diretamente em nitrogênio líquido a 196§. Näo houve diferença estatisticamente significativa, na percentagem de desenvolvimento, em cultura, entre os embriöes criopreservados nos estágios de mórula e blastocisto jovem (p> 0,05) mas houve uma diferença significativa (p<0,05) dos embriöes criopreservados, no estágio de blastocisto, quando comparado com o estágio de mórula e blastocisto jovem.