Estandarización de un método inmunoenzimático de tipo ELISA para medir la concentración de 17 ß-estradiol en saliva / A solid-phase enzyme immunoassay to measure 17 ß-oestradiol in saliva

RESUMEN

Las hormonas esteroides pueden difundir fácilmente a la saliva, donde su concentración es un reflujo de los valores en sangre. El objeto de este trabajo fue estandarizar un método inmunoenzimático competitivo de fase sólida (ELISA) para determinar 17 ß-estradiol (E2) en saliva. El método requiere E2 como antígeno unido a la fase sólida y para la curva de calibración; un suero de oveja anti-17 ß-estradiol (1er. Ab) y un suero de conejo anti-Y-globulina de oveja (2-Ab). Este último fue conjugado a la fosfatasa alcalina y utilizado para valorar la concentración de la hormona mediante la actividad enzimática de la placa. Los resultados muestran una sensibilidad de 2.5 pg, respecto a especificidad, el anticuerpo presenta mínima reacción cruzada con estrona (1.32%) y estriol (2.46%) y la recuperación es de 90 a 95%. La precisión valorada mediante los coeficientes de variación (CV) intra e interensayo es de 4.2-9%y de 4.8-12.1%respectivamente. Con este método los valores de E2 en saliva en mujeres normales oscilaron de 400 a 970 pg/ml en el día del pico preovulatorio y de 50-450pg durante la fase lútea. El método podría ser utilizado para evaluar la función ovárica, con ventajas sobre el radioinmunoanálisis por su precisión, rapidez y bajo costo