Investigaçäo e isolamento de Leishmania: criopreservaçäo de amostras de biópsias de lesöes cutâneas na leishmaniose tegumentar experimental / Investigation and isolation of leishmania: cryopreservation of samples of biopsies from skim lesions in experimental cutaneous leishmaniasi

RESUMO

Foi investigada a viabilidade do isolamento de Leishmania(V.) braziliensis e L.(L.)amazonensis a partir da criopreservaçäo, a -20grausC, -70grausC e -196grausC, de amostras de biópsias de lesöes cutâneas de hamsters(Mesocricetus auratus) experimentalmente infectados. Biópsias de 2mm de diâmetro foram obtidas de lesöes de patas de hamsters. Metade das biópsias foi acondicionada em tubos de poliestireno para congelamento, contendo 1,0ml de soluçäo salina estéril e 0,1ml de glicerol. As amostras restantes foram, individualmente, maceradas em soluçäo salina estéril e acondicionadas em alíquotas de 1,0ml em tubos de poliestireno para congelamento, com 0,1ml de glicerol. Foram constituídos três grupos de tubos, que foram mantidos, inicialmente, por uma noite a 4grausC, sendo transferidos sucessivamente para -20grausC, -70grausC e -196grausC, que foram as temperaturas de manutençäo, respectivamente, para os grupos 1,2 e 3, que assim permaneceram por um período de 60 dias. Após este período as amostras foram descongeladas e examinadas em esfregaços, culturas e inoculaçöes desses materiais. Ambas as espécies de Leishmania sobreviveram na condiçäo de manutençäo estabelecida para o grupo 1, ou seja -20grausC, tanto em biópsia como em homogenizado de macerado de biópsia. L.(L.) amazonensis sobreviveu, também, na condiçäo de manutençäo do grupo 3, a -196grausC