Aislamiento y caracterizacion de proteinas unidas a prolactina en el plasma de pacientes hiperprolactinemicos / Isolation and characterization of prolactin-binding proteins in plasma of hyperprolactinemic patients

RESUMEN

Se analizaron los resultados de la purificación y caracterización de las proteínas que se encuentran unidas a la PRL en el plasma de pacientes hiperprolactinémicos. Se demostró la existencia del complejo proteico mediante incubación del plasma con PRL marcada con yodo radiactivo (PRL-I125), seguido por separación cromatográfica de gel filtración en Sephacryl S-300HR. Se comparó el patrón de elución con proteínas de pesos moleculares conocidos y la radiactividad incorporada se determinó por conteo de las radiaciones gamma. El complejo prolactina-proteína eluyó en un rango de pesos moleculares elevados. Se aislaron las proteínas unidas a la prolactina por cromatografía de afinidad en una columna de prolactina ovina (oPRL) unida a Sepharosa 4B activada con bromuro de cianógeno. La concentración de proteínas en 5 lotes analizados en forma sucesiva, fue de 180"74Fg/fraccionamiento. Las proteínas aisladas mostraron homología inmunológica con la IgG humana mediante el análisis por inmunodifusión radial en geles de agarosa. Según el patrón electroforético encontrado, las proteínas que se unen a la PRL en el plasma están formadas por 4 bandas de pesos moleculares, 2 de las cuales coinciden con las cadenas ligeras y pesadas de la IgG, mientras que las otras 2 presentan pesos moleculares aproximados de 68 y 80 kDa, respectivamente. Los resultados encontrados permiten identificar a las proteínas unida a la PRL como un complejo con una estructura molecular en la cual participa la IgG