Um protocolo de "nested-PCR" para detecção do vírus da anemia das galinhas / A nested-PCR protocol for detection of the chicken anemia virus
Pesqui. vet. bras
; Pesqui. vet. bras;25(2): 106-110, abr.-jun. 2005. ilus, tab
Article
in Pt
| LILACS
| ID: lil-414425
Responsible library:
BR68.1
RESUMO
Este trabalho descreve o estabelecimento de um pro!tocolo de nested-PCR para a detecção do vírus da anemia das galinhas (CAV, chicken anemia virus), agente causador da anemia infecciosa das galinhas. Para a extração de DNA a partir de amostras clínicas um método baseado no uso de tiocianato de guanidina mostrou-se mais sensível e prático, do que os demais avaliados. Para a PCR inicial foi selecionado um par de primers que amplifica uma região de 664 pares de bases (pb) do gene VP1. Para a nested-PCR propriamente dita, foi selecionado um segundo par que amplifica uma região interna de 520 pb. A especificidade dos primers foi avaliada utilizando amostras de lotes controlados para CAV. Outras trinta amostras vírus e bactérias, causadoras de doenças em aves, não geraram produto de amplificação. A sensibilidade do teste foi determinada a partir de diluições seriadas de uma amostra vacinal de CAV. A nested-PCR mostrou ser mais sensível do que a PCR e foi capaz de detectar pelo menos 0,16 TCID50 por cento da cepa vacinal. Além disso, detectou DNA viral em tecidos, soro e cama aviária de lotes com e sem sinais clínicos. Conclui-se que, como técnica para a detecção do CAV, o protocolo de nested-PCR aqui descrito, é mais sensível, rápido e menos trabalhoso do que o isolamento viral em cultivo celular.
Full text:
1
Collection:
01-internacional
Database:
LILACS
Main subject:
Virology
/
Polymerase Chain Reaction
/
Guidelines as Topic
/
Chicken anemia virus
Type of study:
Diagnostic_studies
/
Guideline
Language:
Pt
Journal:
Pesqui. vet. bras
Journal subject:
MEDICINA VETERINARIA
Year:
2005
Document type:
Article
Affiliation country:
Brazil
Country of publication:
Brazil