Análise proteômica comparativa entre plasmas de doadores saudáveis e de pacientes com dengue grave / Comparative proteomic analysis between plasms of patients with dengue hemorrhagic fever and from health donors

RESUMO

O dengue é uma das principais arboviroses humanas e sua patogênese ainda não é bem compreendida. O estudo desta patologia através da abordagem proteômica poderá contribuir para o melhor entendimento da doença, revelando proteínas críticas para os processos celulares envolvidos na infecção pelo vírus Dengue. O objetivo desse trabalho foi comparar os perfis eletroforéticos bidimensionais dos plasmas de pacientes com dengue grave e de doadores saudáveis, identificando proteínas diferencialmente expressas entre estes 2 grupos. Os plasmas foram coletados no Hospital de Clínicas de Niterói (RJ) durante a epidemia de dengue no Estado do Rio de Janeiro em 2001-2002. Na Fase I do trabalho...Na Fase II...Estas foram...como cadeia beta da fibrina, proteína de ligação de vitamina D, vitronectina, componente C3 do complemento, apolipoproteína A-I, haptoglobina, transferrina e hemopexina. Após a combinação dos resultados de 14 géis (7 pacientes e 7 controles), apenas a apolipoproteína A-I apresentou uma diferença estatisticamente significativa, diminuindo de expressão nos plasmas dos pacientes com dengue grave. Na Fase III do estudo, passamos a retirar as 6 proteínas mais abundantes do plasma utilizando a Coluna de Remoção de Múltipla Afinidade e as amostras foram analisadas através da moderna técnica de eletroforese de fluorescência diferencial em gel 2D (DIGE). As imagens dos géis foram comparadas utilizando o software DeCyder Differential Analysis (GE Healthcare) e diversas manchas com expressão diferencial entre os 2 grupos experimentais foram detectadas. Alguns géis de DIGE foram também revelados com Coomassie coloidal e as manchas de interesse foram identificadas como descrito anteriormente. As proteínas que tenderam a aumentar nos plasmas dos pacientes com dengue foram a (alfa)1-glicoproteina ácida, a proteína de ligação de vitamina D, a (alfa)1-antiquimiotripsina, o componente C3 do complemento e o inibidor do componente C1 do complemento; as proteínas que tenderam...