La infección por virus dengue induce la disminución de marcadores de diferenciación en células de neuroblastoma / Dengue virus infection down-regulates differentiation markers in neuroblastoma cells

RESUMEN

Introducción: cerca del 5% de los pacientes con dengue hemorrágico pueden presentar manifestaciones neurológicas; sin embargo, existe poca información sobre la infección directa por el virus dengue (DENV) en neuronas. Objetivo: determinar el papel del fenotipo neuronal en la infección por DENV en células de neuroblastoma SH-SY5Y inducidas o no a la diferenciación con ácido retinoico (AR). Materiales y métodos: células SH-SY5Y fueron inducidas con AR a diferenciarse e infectadas con DENV. Posteriormente se cuantificó la expresión de antígeno viral y de dos marcadores de diferenciación (GAP43 y sinaptofisina). También se evaluó la viabilidad postinfección por la técnica de MTT. Resultados: se encontró que las células diferenciadas son más susceptibles a la infección por DENV, pues se detectó en ellas mayor cantidad de antígeno viral que en las indiferenciadas. A pesar de que el virus indujo muerte celular en ambos tipos de células, la proporción fue mayor en las indiferenciadas (40,3% frente a 21,5%). La infección por DENV en células SH-SY5Y diferenciadas indujo una disminución significativa en la expresión de GAP-43 y sinaptofisina. Conclusiones: los resultados que se presentan permiten sugerir una relación entre la infección viral y la función neuronal, que podría ser importante para esclarecer la patogénesis de las manifestaciones neurológicas durante las formas graves de dengue.

ABSTRACT

Introduction: Approximately 5% of patients suffering from dengue hemorrhagic fever may have neurological manifestations. However, little information is available about direct infection of neurones by dengue virus. Objective: To determine the role of neuronal phenotype during DENV infection in human neuroblastoma cell line SH-SY5Y, either induced or not to differentiate by treatment with retinoic acid (RA). Materials and methods: Neuroblastoma cell line SH-SY5Y was induced to differentiate with RA and infected with DENV. The expression of viral antigen and of two differentiation markers of neurones, GAP-43 and synaptophysin, was evaluated quantitatively. Postinfection viability was also evaluated by the MTT technique. Results: It was found that differentiated cells are more susceptible to infection by dengue virus since more viral antigen was found in them than in the undifferentiated ones. DENV infection caused death in both cell types, but the rate was higher in the undifferentiated ones (40.3% vs 21.5%). In addition, DENV infection in differentiated SH-SY5Y cells induced a significant decrease in GAP-43 and synaptophysin expression. Conclusions: These results allow us to suggest a relationship between DENV infection and neuronal function, which could be important to elucidate the pathogenesis of neurological manifestations occurring in severe dengue disease.