Efecto subagudo de la administración subcutánea de morfina en la apoptosis neuronal en corteza cerebral de ratones machos CF-1 / Effect of subacute administration of subcutaneous morphine in the neuronal apoptosis in the brain cortex of male CF-1 mice

RESUMEN

La prevalencia de dolor crónico moderado a severo es elevada, tanto en pacientes oncológicos como no oncológicos y la principal herramienta en su manejo es la administración de opioides, especialmente morfina. Este tratamiento es efectivo en el efecto analgésico, pero presenta toxicidad renal y hepática, entre otras. En trabajos previos se ha reportado que las sustancias producen efectos tóxicos en el sistema donde actúan. Por lo tanto, es necesario estudiar sus efectos tóxicos a nivel del sistema nervioso central, especialmente en los mecanismos de muerte celular. En la presente investigación se estudia el efecto de una administración subaguda de morfina por vía subcutánea en la apoptosis neuronal en la corteza cerebral de ratones machos CF-1. El diseño experimental incluyó 4 grupos experimentales control negativo, control positivo (vehículo), grupo modelo dolor (inyección plantar de formalina) y grupo experimental (morfina 10% 0,6 ml c/6 horas por 48 horas). Luego de 48 horas se sacrificaron para extraer sus cerebros, los que fueron cortados, fijados y teñidos con técnica corriente (H&E), para analizar morfológicamente la muerte celular. Además, se realizó tinción inmunohistoquímica con anticuerpos anticaspasa-3 para evidenciar la apoptosis como mecanismo de muerte celular. En los cortes se contaron el número de células muertas del total de células en un área determinada, para obtener el porcentaje de células apoptóticas en cada grupo. Los resultados indican la presencia de una diferencia significativa en los niveles de apoptosis del grupo experimental en comparación con el grupo control negativo, sin embargo, la diferencia es mayor entre el grupo modelo dolor versus grupo experimental tanto como con el grupo control negativo. Las células muertas fueron positivas a la tinción inmunohistoquímica con anticaspasa 3. Los resultados sugieren la existencia de un efecto neurotóxico vía apoptosis en la corteza cerebral de la morfina que, sin embargo...

ABSTRACT

The prevalence of moderate to severe chronical pain is high in the oncologic and no oncologic patient, and the gold standard of treatment for the pain management is the administration of opiods, especially morphine. This treatment is effective in the analgesic effect, but it has a renal and hepatic toxicity, among others. In previous papers it has been reported that the substances have produced toxicity in the systems where they produce their effect. Therefore it is necessary to study its toxic effect at a central nervous system, especially its cell death mechanism. In the present investigation it was studies the effect of subaccute administration of subcutaneous morphine in the neuronal apoptosis in the brain cortex of male CF-1 mice. For this purpose 4 experimental groups were used negative control, positive control (vehicle), pain model group and the experimental group (morphine 10%0,6 ml every/6 hours per 48 hours). After 48 hours they were euthanasied in order to remove their brains and then they were sliced, which were fixed and stained with routine technique (H&E), to morphologically analize the cell death. Besides, it was performance immunochemistry stained with anticaspasa 3 antibodies to demonstrate the cell death mechanism via apoptosis. In the slices it was counted the number of death cells from a total of cells in a determinated area, for obtaining the percent of apoptotic cells in each groups. Results indicate the presence of a significative difference in the apoptosis level from the experimental group, in comparison with negative control group, however the difference is greater in the pain model group versus experimental group and even greater versus negative ontrol group. Dead cells were positive in anticaspasa 3 antibody stain. Results suggest the existence of a neurotoxic effect via apoptosis in the cerebral cortex of the morphine, nevertheless is significantly fewer in comparison with pain group, which would confirm the benefits...