Identificación de Clostridium chauvoei por la prueba de coaglutinción / Identification of clostridium chauvoei by coagglutination test

RESUMEN

El método de Coaglutinación estafilocócica (COA) para la identificación de clostridium chavoei fue estudiado con cuatro inmunosueros obtenidoa a partir de las siguientes preparaciones antigénicas (cultivos de 12h de la cepa 5078 de C. chavoei a) células tratadas con formol al 0.5% (CF); b) células calentadas a ebullición 2h (CO) (ambas preparaciones con una concentración de 1.05 x 10**9 células/ml); c) extrato de veronal (EV); células lavadas y lisofilizadas se extrajeron con regulador veronal pH 8.50; y d) suspensión flagelar (F) al cultivo lavado dos veces con solución fisiológica se desflageló por agitación manual, se centrifugó a 3.500 x g y 16.000 x g durante 20 min. Los flagelos fueron separados por filtración en membrana filtrante (poro 0.2µm) observándoselos por impregnación argéntica. Lotes de 3 conejos se inocularon con 5 dosis de cada antígeno (0.2; 0.4; 0.8; 1.6 y 3.2ml) por vía IV. Para la preparación de la proteína A se siguió la técnica modificada de Kronvall. La cepa Cowan I de Staphylococcus aureus se estabilizó adiconando 0.1 ml de cada antisuero a 1 ml de suspensión. Como testigo se sensibilizaton estafilococos con suero normal de conejo. La COA se realizó con las cepas de C. chauvoei 5078, Chl y Ch2, con líquidos biológicos de ratones inoculados con la cepa 5078, con las cepas de C. septicum 3606 y S9 y una cepa de C. perfringens. Las lecturas se realizaron entre 2 y 8 min y se informaron de 0 a 4 +. La prueba fue específica para C. chauvoei y no dio reacciones cruzadas con C. spticum ni C. perfringens. La COA fue más efectiva cuando se utilizaron los antisueros obtenidos con EV (los antígenos estarían más purificados) y con F. En este caso se deberían usar los antígenos flagelares f y g, aunque escparían las mutantes inmóviles. El antisuero CF mostró una COS inferior a las anteriores, pero podría emplearse porque la preparación del antígeno es más sencilla. La COA con anti-CO fue menorm dudosa o negativa, el calor destruye componentes antigénicos. La COA puede ser un valioso elemento para el diagnóstico de C. Chauvoei