Needle muscle biopsy: technique validation and histological and histochemical methods for evaluating canine skeletal muscles / Biópsia muscular por agulha: validação da técnica e dos métodos histológicos e histoquímicos na avaliação do músculo esquelético de cães

ABSTRACT

This study evaluated the needle muscle biopsy technique using a 6G Bergstrõm percutaneous needle combined with histological and histochemical methods to analyze the skeletal muscle of dogs. There are few studies about canine skeletal muscles and a lack of reports in the literature about tissue collection and analysis for canine species. Evaluation of 32 German Shepherd samples collected from the gluteus medius, at a depth of 3 cm, was performed. The choice of gluteus medius and the 3-cm depth provided good quantity fragments with sufficient sizes (35 mm), which permitted optimal visualization of muscle fibers. Myosin ATPase, at pH 9.4, 4.6, and 4.3, and SDH reactions revealed that all muscle samples analyzed had fibers in the classic mosaic arrangement, enabling counting and typification. The mean percentages of fibers were 29.95% for type I and 70.05% for type II. On the basis of these results, we concluded that the percutaneous needle biopsy technique for canine skeletal muscles is a safe and easy procedure that obtains fragments of proper sizes, thereby enabling the study of muscle fibers. Standardization of the muscle of choice and the depth of muscle sample collection significantly contributed to this success. This is an important method to evaluate muscle fiber types of dogs and diagnose important diseases affecting the skeletal muscles.(AU)

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi avaliar a técnica de biopsia muscular por agulha de biópsia percutânea tipo Bergstrõm nº seis, e os métodos histológicos e histoquímicos utilizados na análise do músculo esquelético de cães, uma vez que estudos sobre a musculatura esquelética em cães são poucos o que acarreta um número pequeno de relatos na literatura sobre métodos de coleta e análise desse tecido nessa determinada espécie. Foram avaliadas amostras de 32 animais da raça Pastor Alemão coletadas do músculo glúteo médio a uma profundidade de três centímetros. A escolha da profundidade de três centímetros e do músculo Glúteo Médio em cães da raça Pastor Alemão denotou fragmentos colhidos com suficiente viabilidade, bons padrões de tamanho (entre três e cinco milímetros) e boa quantidade e qualidade, permitindo ótima visualização das fibras musculares dos animais da amostra. Nas reações enzimo-histoquímicas da miosina ATPase no pH 9.4, 4.6 e 4.3 e SDH todos os músculos examinados apresentavam a distribuição das fibras musculares com o clássico padrão de mosaico, possibilitando a contagem e a diferenciação dos diferentes tipos. O valor médio de fibras tipo I foi de 29,95% e o valor médio de fibras tipo II, 70,05%. Com base nesses resultados, pode-se concluir que a técnica de biopsia com agulha percutânea utilizada em músculo esquelético de caninos, demonstrou ser um procedimento seguro e de fácil recuperação, obtendo fragmentos de tamanho adequado e, portanto, viabilizando o estudo. A padronização do músculo e da profundidade de coleta da amostra muscular teve contribuição importante. Sendo um importante meio para avaliar os tipos de fibras musculares em cães e no diagnóstico de importantes enfermidades que acometem a musculatura esquelética.(AU)