APPLICATION OF POLIMERASE CHAIN REACTION FOR DETECTION OF Mycoplasma spp IN THE ROUTINE OF CELL CULTURES / APLICAÇÃO DA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE PARA DETECÇÃO DE Mycoplasma spp NA ROTINA DE CULTIVOS CELULARES

ABSTRACT

The occurrence of Mycoplasma spp as contaminant of cell cultures in cell culture laboratories of the Escola de Veterinária da UFMG and of the Laboratório Nacional Agropecuário de Minas Gerais was obtained by the use of a fast DNA extraction protocol e by the use of PCR. The PCR sensitivity and specificity were evaluated. The search for Mycoplasmas DNA was done in 83 cell lines samples. We found infected cell lines in both laboratories. The quality of extracted DNA was verified using a beta-actin gene PCR. The Mycoplasmass PCR showed to be fast, sensitive and specific. KEY WORDS Beta-actin, cell, culture, Mycoplasma spp, PCR.

RESUMO

A ocorrência de Mycoplasma spp como contaminante de cultivos celulares nos laboratórios de cultivo celular da Escola de Veterinária da UFMG e do Laboratório Nacional Agropecuário de Minas Gerais foi estabelecida através da implementação de um protocolo rápido de extração de DNA e pela utilização da PCR. Avaliaram-se a sensibilidade e especificidade da PCR. Realizou-se pesquisa de DNA de Mycoplasmas em 83 amostras de linhagens celulares e encontraram-se linhagens infectadas nos dois laboratórios avaliados. A qualidade do DNA extraído foi verificada utilizando-se a PCR para o gene da beta-actina. A pesquisa de Mycoplasmas por PCR mostrou-se rápida, sensível e específica.PALAVRAS-CHAVES Beta-actina, celular, cultivo, Mycoplasma spp, PCR.