In vitro conservation of 'Florida Rough' lemon plants / Conservação in vitro de plantas de limoeiro 'Rugoso da Florida'

ABSTRACT

The establishment of minimum growth conditions is essential for in vitro germplasm conservation. Changes to the basic medium and carbon source concentrations are important factors for reducing plant growth in vitro. This study adjusted a protocol for the in vitro conservation of 'Florida Rough' lemon plants. Microcuttings (approximately 1 cm) from plants that were previously cultivated in vitro were inoculated into test tubes with 10 mL of woody plant medium (WPM) at different concentrations (1/1, 1/2 and 1/4) and supplemented with 0, 12.5, 25 and 50 g.L-1 of sucrose, solidified with 7 g.L-1 agar and adjusted to pH 5.8. The experiment was completely randomized in a 3 x 4 factorial design with 15 replications and was maintained under controlled conditions for 360 days. After this period the plant height in cm (PH), the plant dry mass in g (PDM) and the 21 numbers of green leaves (NGL), senescent leaves (NSL) and microcuttings (NM) were evaluated. The variables that best explained the observed behavior of the 'Florida Rough' lemon plants were NGL and PH, with values of 61.63 and 35.08%, respectively. The original concentration of the WPM with the addition of 25 g. L-1 of sucrose yielded the best 'Florida Rough' lemon plant growth reduction in vitro while maintaining the physiologically health of the plants.

RESUMO

O estabelecimento de condições de crescimento mínimo é fundamental para a conservação in vitro de germoplasma. Alterações nas concentrações do meio básico, na fonte de carbono, são fatores importantes na desaceleração do crescimento de plantas in vitro. Este trabalho teve como objetivo ajustar um protocolo de conservação in vitro de plantas do limoeiro 'Rugoso da Flórida'. Microestacas de plantas previamente cultivadas in vitro, com aproximadamente 1 cm, foram inoculadas em tubos de ensaio contendo 10 mL do meio de cultura WPM em diferentes concentrações (1/1, 1/2 e 1/4), suplementado com 0; 12,5; 25 e 50 g.L-1 de sacarose, solidificado com 7 g.L-1 de ágar e o pH ajustado em 5,8. O experimento foi instalado em delineamento inteiramente casualizado com 15 repetições, em esquema fatorial 3 x 4, e mantido sob condições controladas durante 360 dias. Após este período, foram avaliadas altura de planta em cm (AP), número de folhas verdes (NFV), número de folhas senescentes (NFS), número de microestacas (NM) e massa da planta seca em g (MPS). As variáveis que mais contribuíram para explicar a diferença existente no comportamento das plantas do limoeiro 'Rugoso da Flórida' no meio de cultura WPM foram NFV e AP com 61,63 e 35,08%, respectivamente. O meio de cultura WPM na sua concentração original com a adição de 25 g.L-1 de sacarose promoveu os melhores resultados na redução do crescimento das plantas in vitro do limoeiro 'Rugoso da Flórida', mantendo-as fisiologicamente sadias.