Validação da metodologia de quantificação espectrofotométrica das saponinas de Pfaffia glomerata (Spreng) Pedersen - Amaranthaceae

RESUMO

Realizou-se validação analítica espectrofotométrica das saponinas totais das raízes de Pfaffia glomerata. Em testes iniciais utilizou-se saponina Merck em cinco concentrações (0,08-0,28 mg/ml) para obtenção da curva de calibração e verificação da linearidade, repetibilidade e reprodutibilidade. As raízes foram avaliadas em extratos hidroalcoólicos purificados com n-butanol. O reagente cromogênico escolhido foi Cloreto de Cobalto 0,2 por cento em pico experimental em 284nm. O tempo de leitura ideal foi de 10-20 minutos após o início da reação. O método mostrou linearidade para a faixa de concentrações utilizadas (R²= 0,9963). A precisão (coeficientes de variação) situou-se entre 7-12 por cento, indicando boa reprodutibilidade. O limite de quantificação situou-se em 0,08 mg/ml e o limite de detecção em 0,02 mg/ml. A exatidão do procedimento forneceu erro relativo de 6,3; 3,4; 3,5; 1,8 e 0,3 por cento para as concentrações utilizadas. Os dados da curva-padrão foram aplicados em várias amostras de raízes levando ao valor média de 13,5±2,0 por cento. Os dados obtidos permitem a quantificação espectrofotométrica das saponinas totais das raízes de P. glomerata.

ABSTRACT

Was made standardization for the spectrophotometric quantification method of Pfaffia glomerata roots saponins. The initial tests made use of Merck saponin, prepared in five different concentrations (0.08-0.28 mg/ml) for obtaining the calibration curve and linearity; the tests with the roots were carried out with hydroalcoholic extracts purified with n-butanol. The chromogenic reagent was Cobalt chloride in the concentration of 0.2 percent and the scanning of 200 through 400 nm of wavelength leaded to a maximum absorption peak in 284 nm. The method showed linearity for the concentrations range used (R²= 0.9963). The precision (variance coefficients) was between 7 and 12 percent and the quantification limit was 0.08 mg/ml, and the detection limit 0.02 mg/ml. The accuracy of the proposed procedure presented relative error of 6.3; 3.4; 3.5; 1.8 and 0.3 percent for the concentrations used. The data from the standard curve were applied in some roots samples, leading to the values of total saponins average 13,5±2,0 percent. The data obtained allow the spectrophotometric quantification of Merck saponin and the saponins from the P. glomerata roots.