Análisis cromatográfico del contenido enzimático del veneno de tres serpientes peruanas / Chromatography analysis of enzyme content in three Peruvian snake venom

RESUMEN

Las serpientes que habitan la selva amazónica tienen venenos cuya composición varía con la especie. Pero existen también especies de coste y otras que son arborícolas cuyo estudio es motivo de interés para este laboratorio. En dos serpientes de costa Bothrops pictus y Bothrops rodengheri así como en una de selva, arborícola, Bothriopsis oligolepis; se ha realizado una exploración de las principales enzimas contenidas en sus venenos luego de efectuar un fraccionamiento cromatográfico. Para ello, muestras de 50 mg. De cada veneno se fraccionaron en una columna de Sephadex G-100 con buffer acetato de amonio 0.05 M, pH 7.0 analizándose luego las actividades enzimáticas de Hialuronidasa, fosfodiesterasa, 5’ nucleotidasa, Similar a Trombina, Proteasa y Fosfolipasa A2. Los resultados mostraron variaciones muy notables en los pisos de proteínas de los venenos utilizados, así como la posición relativa y la actividad de las enzimas en estudio. En el veneno de B. oligolepis se encontraron 3 picos proteicos definidos mientras que las ponzoñas de las serpientes de costa tuvieron perfiles semejantes entre sí. Así mismo las actividades de Fosfodiesterasa, 5’ Nucleotidasa y Hialuronidasa tienen los valores de Ve/ Vo más pequeños, habiéndose encontrado en B. rodengheri esta última actividad, en cambio la Fosfolipasa A2 mostró valores de Ve/Vo notablemente elevados. También se encontraron diferencias en las actividades específicas de las enzimas investigadas pudiéndose deducir a partir de ellas, el rol biológico que cumplirían durante en envenenamiento.

ABSTRACT

In the Amazonic jungle habit snakes and their venoms have different chemical composition according to species. Besides there are some snakes from coast and others habit on trees having their venoms a particular interest to our laboratory. The venoms of Bothrops pictus and Bothrops rodengheri (both snakes) as well as Bothriopsis oligolepis (tree snake) have been in investigated on enzymatical composition after a chromatographical fractionation. 50 mg of each venom were fractionated on a Sephadex G-100 column, using 0.05 M ammonium acetate pH 7.0 as eluting. Thus, Hyaluronidase, Phosphodisterase, 5’-nucleotidase, Thrombin-like Enzyme, Proteolytic and Phospholipase A2 activities were measured after that. The results showed remarkable variation on peaks of protein obtained, as well as chromatographical position and activity in each case. On B. oligolepis venom three peaks were obtained while protein profile of coast snake venoms were similar. Phosphodiesterase, 5’-nucleotidas and Hyaluronidase exhibited little Ve/Vo values, however Hyaluronidase activity was not registered in B. rodengheri. Phospholipase A showed a great V/V values in all venoms in study. In addition specific activity differences were found among the three venoms, thus a biological effect would be related to these activity values.