Investigación de la mucina de tipo 1 (MUC1) circulante y tisular en el cáncer de mama / Investigation of the circulating and tissue type 1 mucin (MUC 1) in the breast cancer

RESUMEN

Las mucinas (MUC) son glicoproteínas que se localizan y expresan en la mayoría de los epitelios y han sido recientemente relacionadas con el cáncer de mama. entre ellas, la MUC1 constituye una mólecula de elevado peso molecular que en la célula maligna puede presentar una glicosilación aberrante o incompleta que la convierte en inmunogénica. Los objetivos del presente trabajo de investigación han sido 1- estudiar la expresión celular de MUC1 en el cáncer de mama y en neoplasias mamarias benignas; 2- estudiar los niveles de MUC1 sérica como marcador tumoral; 3- investigar la relación entre la expresión sérica y tisular y 4- detectar anticuerpos séricos anti MUC1 libres y acomplejados. Se incluyeron 70 pacientes con cáncer de mama de las que se obtuvieron 70 muestras de tejido tumoral y 65 sueros y los controles fueron 5 muestras de tejido normal, 8 displasias y 135 sueros de mujeres sanas. además, se emplearon sueros de pacientes con cáncer de mama pre y post vacunación con un péptido derivado de MUC1. Por otra parte, se utilizaron 3 monoclonales (MAbs) que reaccionan con el centro proteico de la molécula de MUC1 C595, SM3 y HMFG2. Los métodos empleados fueron inmunocito e inmunohistoquímica con procesamiento de imágenes y análisis cuantitativo, preparación de membranas subcelulares; SDS-PAGE y Western blot, cultivo primario de tumores malignos, ensayos de tumorigenicidad, detección de MUC1 circulante, determinación de complejos inmunes anti-MUC1 y detección de anticuerpos libres anti-MUC1 mediante ELISA (enzimoinmunoensayo en fase líquida); los datos fueron analizados estadísticamente. Los resultados fueron los siguientes la inmunohistoquímica reveló que las muestras de cáncer de mama fueron positivas en el 73 por ciento con un patrón de expresión fundamentalmente en la membrana plasmática, o bien mixto tanto en la membrana plasmática como en el citoplasma. En los cultivos primarios se observó expresión de MUC1 principalmente citoplásmica en todos los casos con los MAbs empleados. En los controles, el patrón de reactividad fue apical o en la luz de las glándulas siendo negativo el SM3 para las neoplasias benignas. mediante Western-blot fue posible observar que las fracciones subcelulares de neoplasias malignas fueron positivas dando una banda de reacción de >200kD con los tres MAbs ensayados... (TRUNCADO)