Susceptibilidad in vitro de candida spp a caspofungina y anfotericina B por los métodos de microdilución en caldo (CLSI), etest y el sistema vitek2. Estudio Comparativo / In vitro susceptibility of candida spp to caspofungin and amphotericin B by broth microdilution methods (CLSI), etest and the vitek2 system. Comparative study

RESUMEN

El objetivo de este estudio fue evaluar la susceptibilidad de Candida spp., a caspofungina (CS) y anfotericina B (AMB) por los métodos de microdilución en caldo (CLSI), Etest y sistema automatizado Vitek 2. Se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de 208 aislados de Candida spp., obtenidos de pacientes con candidemia, a caspofungina por microdilución en caldo (documento M27-A3 del CLSI) e Etest y a anfotericina B por Etest y Vitek2. Las CMI para Etest y CLSI se leyeron visualmente tras 24 h de incubación a 35°C. El punto final para Vitek 2 fue determinado por el equipo. El punto final de CMI para CS se determinó como la menor concentración que produjo disminución significativa (≥50%) de crecimiento con respecto al control. El punto final para AMB se leyó como la menor concentración que produjo inhibición total (100%) de crecimiento. Se utilizaron las cepas C.parapsilosis ATCC 22019 y C.krusei ATCC 6258 como control de calidad, de acuerdo a las recomendaciones del CLSI. Los métodos Etest y Vitek 2 fueron capaces de detectar aislados susceptibles en todas las cepas evaluadas. Las CMI estuvieron dentro de los valores esperados. Los resultados mostraron buena concordancia esencial (98%) entre microdilución en caldo y Etest y entre Etest y Vitek (65%), Por lo tanto se recomienda su uso en la evaluación de susceptibilidad in vitro a caspofungina y anfotericina B como método alternativo para los laboratorios asistenciales. Se requieren estudios adicionales para verificar la habilidad de Vitek 2 en la identificación de cepas resistentes a AMB y CS

ABSTRACT

The aim of the study was to test the susceptibility of Candida spp., against caspofungina and amphotericin B with CLSI broth microdilution (BMD), Etest and an automated system Vitek2. We determined the Minimal Inhibitory Concentration (MIC) from 208 Candida spp. isolates recovered from candidemia patients, to caspofungina and amphotericin B, with broth microdilution (M27-A3 CLSI document), Etest and Vitek. BMD and Etest MICs were read visually after 24 h incubation at 35 ºC. Vitek2 endpoints were determined spectrophotometrically by automated components of this equipment. Caspofungina MIC endpoint was determined as the lowest concentration that caused a significant diminution ≥50% of growth below the growth control. Amphotericin B MIC endpoint was read as the lowest concentration that produced the complete inhibition (100%) of growth. Quality control was performed by testing CLSI recommended strains C. parapsilosis ATCC 22019 and C. krusei ATCC 6258. Etest and Vitek methods were able to detect susceptible isolates in all strains tested. MICs were within expected values. Values of essential agreement were good 98% between CLSI and Etest and 65% between Vitek and Etest. Therefore, they are recommended to test in vitro susceptibility to caspofungina and amphotericin B as a reliable alternative method for using in clinical laboratories. More studies are necessary to verify Vitek´s 2 ability to identify resistance isolates to amphotericin B.