Efeito do EDTA sobre o teste de redução do Tetrazólio Nitroazul (NBT) para avaliação do metabolismo oxidativo dos neutrófilos de equinos / EDTA effects on the Tetrazolium Nitroblue test (NBT) to the equine neutrophil oxidative metabolism evaluation

RESUMO

Objetivou-se comparar a capacidade dos neutrófilos reduzirem NBT em amostras sangüíneas colhidas com heparina e EDTA. Para tal, sangue total de 30 eqüinos SRD sadios, adultos e de ambos os sexo foram divididas em dois tubos, um contendo heparina sódica (10U/mL) e o outro EDTA potássico (1,8mg/mL). Imediatamente após a colheita realizaram-se os testes de redução espontânea e estimulada do NBT. Em ambas as provas de redução do NBT, amostras colhidas com heparina apresentaram maior destruição celular, formação de precipitado e de agregados celulares do que as tratadas com EDTA. A média de redução espontânea do NBT em amostras com EDTA (5,93%) não diferiu das obtidas com heparina (4,2%). Na prova estimulada, a média de neutrófilos redutores de NBT em amostras com EDTA (10,43%) foi menor (p<0,05) do que as obtidas com heparina (36,1%). Conclui-se que o EDTA pode ser utilizado com vantagens em relação à heparina na prova de redução espontânea do NBT, entretanto, efeito quelante deste anticoagulante compromete a produção de superóxido em neutrófilos estimulados com extrato bacteriano.

ABSTRACT

The aim of the present study was to compare the neutrophils ability to reduce NBT in blood samples collected with heparin and EDTA. For this purpose, blood samples from 30 horses were collected of non-defined mix breed, healthy, adults and from both sexes animals, the samples were divided into two tubes, one containing sodium heparin (10U/mL) and other potassium EDTA (1.8 mg/mL). Immediately after the blood collection, the tests of spontaneous and stimulated reduction of NBT were conducted. In both reducing NBT tests, heparinized samples had higher cell destruction, precipitate and cellular aggregates in comparison with those treated with EDTA. The average of spontaneous NBT reduction in samples with EDTA (5.93%) did not differ from those obtained with heparin (4.2%). In stimulated test, the NBT reduction average of neutrophils in samples with EDTA (10.43%) was lower (p <0.05) than those obtained with heparin (36.1%). It is concluded that EDTA can be used with advantages over heparin in the spontaneous NBT reduction test, however, the anticoagulant chelating effect compromises neutrophils superoxide production when stimulated with bacterial extract.