Evaluation of the antibacterial activity of Crotalus durissus terrificus crude venom / Avaliação da atividade antibacteriana do veneno bruto de Crotalus durissus terrificus

ABSTRACT

Snake venoms are recognized as a promising source of pharmacologically active substances and are potentially useful for the development of new antimicrobial drugs. This study aimed to investigate the antimicrobial activity of the venom from the rattlesnake Crotalus durissus terrificus against several bacteria. Antibacterial activity was determined by using the plate microdilution method and the activity on the bacterial envelope structure was screened by using the crystal violet assay. The proteins in crude venom were separated by electrophoresis and characterized regarding their proteolytic activity. C. d. terrificus venom exhibited antimicrobial action against gram-positive and gram-negative bacteria. MIC values were defined for Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (62.5 µg/mL), Staphylococcus aureus ATCC 25923 (125 µg/mL), and Micrococcus luteus ATCC 9341 (≤500 µg/mL). For Salmonella enterica serovar typhimurium ATCC 14028 and Corynebacterium glutamicum ATCC 13032, the decrease in bacterial growth was not detected visually, but was statistically significant. The crystal violet assay demonstrated that the crude venom increased bacterial cell permeability and the secreted protein profile agreed with previous reports. The results suggest that the proteins with lytic activity against bacteria in C. d. terrificus venom deserve further characterization as they may offer reinforcements to the weak therapeutic arsenal used to fight microbial multidrug resistance.

RESUMO

Os venenos de serpentes são reconhecidos como uma fonte promissora de substâncias farmacologicamente ativas e potencialmente úteis para o desenvolvimento de novas drogas antimicrobianas. Esse trabalho teve como objetivo investigar a atividade antimicrobiana do veneno de Crotalus durissus terrificus contra várias bactérias. A determinação da atividade antibacteriana foi realizada pelo método de microdiluição em placas e a ação na estrutura do envelope bacteriano pelo ensaio violeta de cristal. As proteínas do extrato bruto foram separadas por eletroforese e caracterizadas quanto à sua atividade proteolítica. O veneno de C. d. terrificus apresentou ação antimicrobiana frente bactérias gram-positivas e gram-negativas. Os valores de MIC foram definidos para Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (62.5 µg/ mL), Staphylococcus aureus ATCC 25923 (125 µg/mL) e Micrococcus luteus ATCC 9341 (≤ 500 µg/mL). Para Salmonella enterica serovar typhimurium ATCC 14028 e Corynebacterium glutamicum ATCC 13032, o decréscimo no crescimento bacteriano não foi detectado visualmente, mas foi estatisticamente significante. O teste do cristal violeta demonstrou que o veneno bruto aumentou a permeabilidade das células bacterianas e o perfil de proteína secretada está em consonância com relatos anteriores. Os resultados sugerem que as proteínas com atividade lítica contra bactérias no veneno de C. d. terrificus merecem atenção para uma melhor caracterização, uma vez que podem trazer reforços para o escasso arsenal terapêutico empregado para combater a multirresistência microbiana.