Decline in Mycobacterium bovis and Brucella abortus populations during the maturation of experimentally contaminated parmesan-type cheese / Decaimento do Mycobacterium bovis e da Brucella abortus durante a cura de queijo tipo parmesão experimentalmente contaminado

ABSTRACT

Brazilian legislation allows the manufacture of raw milk cheese with a maturation exceeding 60 days at room temperature above 5C, but there is a lack of solid scientific evidence on the efficacy of this maturation process in inactivating important pathogens that may be present in milk, such as Mycobacterium bovis and Brucella abortus. Thus, the objectives of this study were to produce parmesan-type cheese experimentally contaminated with M. bovis and B. abortus and evaluate the survival of these pathogens along 2-month maturation. Parmesan-type cheese was manufactured in the laboratory using whole pasteurized milk with or without inoculation with M. bovis (SB1033) or B. abortus (1119-3) and matured at 18C for up to 63 days. M. bovis was inoculated in Stonebrink-Leslie medium supplemented with antibiotics and incubated at 37C for 45 days, and B. abortus was incubated in Farrel medium at 36C for 3 days. The average D18C value, weighted by variance, was 37.5 ± 5.3 days for M. bovis and 5.9 ± 0.7 days for B. abortus. The average physicochemical parameters in the cheese at the end of the study were as follows pH = 4.89, water activity = 0.976, and moisture percentage = 43.1%. The pH might have contributed to the reduction in the population of B. abortus but seems not to have influenced the population of M. bovis. We conclude that the duration of the maturation process influences the size of the surviving populations of M. bovis and B. abortus, and that the shortening of the maturation duration might not ensure a decline in pathogen levels to safe levels. Thus, complementary studies considering the effect of several other technological aspects on the survival of these pathogens are required, including the effect of the lactic acid bacterial population, salt content, and temperature of maturation.

RESUMO

A legislação brasileira permite a fabricação queijos de leite cru com maturação superior a 60 dias em temperatura acima de 5C, mas falta evidência científica sólida sobre a eficácia do processo de maturação na inativação de importantes patógenos que podem estar presentes no leite, como o Mycobacterium bovis e a Brucella abortus. Assim, os objetivos desse estudo foram produzir o queijo tipo parmesão experimentalmente contaminado com M. bovis e B. abortus e avaliar a sobrevivência desses patógenos ao longo de 2 meses de maturação. Queijo do tipo parmesão foi fabricado em laboratório com leite pasteurizado integral com ou sem inoculo de M. bovis (SB1033) ou B. abortus (1119-3) e maturado a 18C por até 63 dias. M. bovis foi semeado em meio Stonebrink-Leslie, acrescido de antibióticos, e incubado a 37C por 45 dias e a B. abortus foi semeada em meio Farrel a 36C por 3 dias. O valor D18C médio, ponderado pela variância, foi de 37,5 ± 5,3 dias para o M. bovis e de 5,9 ± 0,7 dias para a B. abortus. Os parâmetros físico-químicos médios do queijo no final do estudo foram como se segue pH = 4,89, atividade de água = 0,976 e umidade percentual = 43,1%. O pH pode ter contribuído para redução da população de B. abortus mas parece não ter influenciado a população de M. bovis. Concluiu-se que a duração do processo de maturação influencia o tamanho da população sobrevivente de M. bovis e de B. abortus e que o encurtamento do período de maturação pode não garantir um declínio desses patógenos para níveis seguros. Assim, estudos complementares que considerem o efeito de vários outros aspectos tecnológicos na sobrevivência desses patógenos são necessários, incluindo o efeito da população de bactérias ácido láticas, teor de sal e temperatura de maturação.