Isolation-characterization and preliminary immunological studies of a Trypanosoma cruzi antigenic component

ABSTRACT

De epimastigotes de T. cruzi (cepa Tulahuén 2) lisados por presión/descompresión, sometidos luego a una extracción acuosa, calentamiento a 100-C y filtración por Sephadex G100, fue posible obtener un componente antigénico de PM 37Kd (T37K), el que eluyó en el segundo pico de la filtración por el gel. Analizado por SDS-PAGE, mostró una sola banda homogénea, constituida por una glicoproteínmas capaz de unirse a concanavalina A. Cuando fue refiltrado por Sephacryl S200 se observó un solo pico de elución. La inmunización de conejos con T37K produjo anticuerposs que reaccionaron específicamente con la membrana de epimastigotes (analizados por inmunofluorescencia indirecta) y con la mayoría de las fracciones subcelulares del parásito, excepto la flagelar en reacciones de precipitación. Un elevado porcentaje de sueros provenientes de pacientes chagásicos, analizados por ELISA e inmunoprecipitación, mostraron poseer anticuerposs específicos para el antígeno T37K. Los títulos de ELISA con T37K fueron mayores que los obtenidos con la fracción subcelular utilizada como referencia (sobrenadante) de 30 000xg de lisado de epimastigotes), lo que estaría indicando una mayor sensiblilidad para la técnica realizada con el antígeno purificado. Estos resultados indican que T37K es altamente eficiente en la detección de anticuerposs anti-T. cruzi, ya sea en reacciones Ag-Ac de interacción primaria o secundaria. La utilización de este antígeno en ambos tipos de reacciones, asegura igualdad en la especificidad de los anticuerposs detectados, hecho que en la práctica diaria generalmente no ocurre, pues los antígenos usados para las diferentes reacciones serológicas no son los mismos (AU)