Avaliação da influência dos genótipos do gene PYCARD e da inflamação no consumo de ração, peso e indução de asma em camundongos geneticamente selecionados para alta ou baixa resposta inflamatória

RESUMO

A asma é uma patologia heterogênea e multifatorial, caracterizada pela inflamação das vias aéreas. Uma das comorbidades que impactam essa patologia é a obesidade. Estudos mostram relação entre asma, obesidade e a ativação da via do inflamassoma, buscando compreender melhor essa associação foram utilizados, no presente trabalho, camundongos geneticamente selecionados para a resposta inflamatória aguda máxima (AIRmax) e mínima (AIRmin). A ativação do inflamassoma é essencial no processamento das citocinas IL-1β e IL-18. Essas ativações dependem da proteína adaptadora ASC, codificada pelo gene PYCARD. Foram produzidas no Laboratório de Imunogenética sublinhagens da inflamação portadoras dos diferentes genes do PYCARD. Após a genotipagem, foi observado que os animais AIRmax possuíam os alelos fixados em homozigose no gene (C/C), mas os AIRmin apresentavam polimorfismo. Através de acasalamentos assistidos por genotipagem, foram produzidas as sublinhagens AIRmin com os genótipos de PYCARD (C/C, T/T), em que os animais T/T apresentavam uma mutação , levando ao mal funcionamento da via do inflamassoma. O objetivo deste estudo foi avaliar a interferência dos alelos do gene PYCARD no ganho de peso e consumo de ração nos animais da linhagem AIR. Além de padronizar um protocolo de indução a asma. Nossos resultados mostram que a ingestão de alimentos é semelhante em AIRmax e AIRmin C/C. Em todas as linhagens, as fêmeas comem menos e são mais leves que os machos. Os animais AIRmin C/C possuem o maior peso em relação às outras linhagens, e os AIRmin T/T apresentam o menor peso. Nossa avaliação da mecânica pulmonar demonstrou que a linhagem AIRmin (C/C ou T/T) apresenta resistência das vias aéreas (Rn) e do parênquima (G) mais altas que AIRmax. Já na elasticidade das vias aéreas os animais AIRmax apresentaram valores mais altos. Após a indução à asma, os animais AIRmax e AIRmin C/C obtiveram uma maior porcentagem de eosinófilos no lavado pulmonar. Quando comparamos os animais AIRmin pudemos observar que os AIRmin C/C. apresentaram maior quantidade de eosinófilos que os AIRmin T/T, além disso, os AIRmin T/T foram a única linhagem que não demonstrou diferença da porcentagem de eosinófilos entre os grupos experimentais e controles. Quanto aos demais tipos celulares, para os macrófagos/monócitos os AIRmin T/T apresentaram os maiores valores, os AIRmax, intermediários e os AIRmin C/C, os menores. Enquanto, os animais AIRmin C/C apresentaram maiores valores de linfócitos em relação às outras duas linhagens. Ao testar os diferentes protocolos de indução à asma experimental utilizando ovalbumina, nossos resultados mostraram uma tendência diferencial, porém é necessário mais ensaios para definir o melhor protocolo. Desta forma, nossos resultados evidenciam uma correlação entre asma e inflamassoma, bem como a compreensão da função pulmonar na linhagem AIR e seu acúmulo de peso.