Otimização da expressão e purificação de proteína recombinante imunossupressora

ABSTRACT

The discovery of immunosuppressive drugs in the 1960s enabled immense advances in medicine, being used, for example, in transplant patients, with the purpose of treating and/or preventing graft rejection. Studies in the area continue to grow and evolve, in search of updates to the more targeted and specific therapeutic arsenal. At the Immunochemistry Laboratory of the Butantan Institute, a protein in the venom of the Lachesis muta snake was isolated and identified with immunosuppressive properties, named LMVp. The use of recombinant DNA technology has allowed advances in the synthesis of immunobiologicals, being crucial for research into the structure, function and production of therapeutic medicines. With the aim of achieving more effective performance in obtaining LMVp, this work used competent bacteria from the BL21 DE3 STAR PLYSS strain in an attempt to achieve optimization of the expression, purification and concentration processes of the recombinant protein. However, this optimization path did not prove to be efficient, demonstrating that other strategies must be followed to obtain better LMVp performance.

RESUMO

A descoberta das drogas imunossupressoras na década de 60 possibilitou imenso avanço na medicina, sendo utilizado, por exemplo, em pacientes transplantados, com a finalidade de tratamento e/ou prevenção da rejeição de enxertos. Os estudos na área continuam crescendo e evoluindo, em busca de atualizações do arsenal terapêutico mais direcionado e específico. No Laboratório de Imunoquímica do Instituto Butantan, uma proteína no veneno da serpente Lachesis muta foi isolada e identificada com propriedades imunossupressoras, nomeada LMVp. O uso da tecnologia de DNA recombinante permitiu avanços na síntese de imunobiológicos, sendo crucial para pesquisas sobre estrutura, função e produção de medicamentos terapêuticos. Com o objetivo de alcançar um desempenho mais efetivo na obtenção da LMVp, este trabalho utilizou as bactérias competentes da linhagem BL21 DE3 STAR PLYSS na tentativa de alcançar uma otimização dos processos de expressão, purificação e concentração da proteína recombinante. Entretanto, este caminho de otimização não se mostrou eficiente, demonstrando que se deve seguir outras estratégias para se obter melhor rendimento da LMVp.