Purificación de ADN genómico humano para el diagnóstico del lupus eritematoso sistémico / Purification of human genomic DNA for the diagnosis of the systemic lupus erythematosus

RESUMEN

Fundamento La molécula de ADN constituye un antígeno necesario en el recubrimiento de un sistema inmunoenzimático destinado al diagnóstico de enfermedades autoinmunes, específicamente del lupus eritomatoso sistémico. Por otra parte, esta molécula se emplea en la obtención de anticuerpos monoclonales anti ADN de doble cadena. Objetivo: Se evaluó la calidad del ADN humano purificado por el método del fenolcloroformo con fines diagnósticos. La molécula fue obtenida por primera vez en el Centro de Inmunología y Productos Biológicos de Camagüey. Método: El ADN se extrajo a partir de tejido prostático de un paciente con hiperplasia prostática benigna. Se realizó la técnica convencional de fenolcloroformo/alcohol isoamilico. El tejido fue previamente tratado con Pronasa a 56ºC. La corrida electroforética se realizó en gel de agarosa 0,8 %, y se determinó la relación 260/280nm mediante espectrofotometría, con la finalidad de evaluar la integridad de la macromolécula, así como el grado de pureza de la misma respectivamente(AU)

ABSTRACT

Background: The DNA molecule constitutes a necessary antigen in the capping of an immunoenzymatic system dedicated to the diagnosis of autoimmune diseases, specifically of the systemic lupus erythematosus. On the other hand, this molecule is used for obtaining the anti DNA monoclonal antibodies´ of double chain. Objective: The quality of the purified human DNA was evaluated by the phenol method: chloroform with diagnostic purposes. The molecule for the first time was obtained in the Center of Immunology and Biological Products of Camagüey. Method: The DNA was extracted from a patient's prostatic tissue with benign prostatic hyperplasia. The conventional technique of phenol chloroform / isoamyl alcohol was perfomed. The tissue was previously treated with Pronasa at 56ºC. The agarose gel electrophoresis was performed at 0,8% and the relationship 260/280nm was determined by spectrophotometry, with the purpose of evaluating the integrity of the macromolecule, as well as its grade of purity respectively(AU)