Detección de Mycoplasma genitalium mediante Reacción en Cadena dela Polimerasa en muestras urogenitales de individuos cubanossexualmente activos / Detection of Mycoplasma genitalium by Polymerase Chain Reaction in urogenital samples from sexually-active Cuban individuals

RESUMEN

El diagnóstico de las infecciones por Mycoplasma genitalium mediante métodos bacteriológicos tradicionales resulta laborioso y poco práctico. Es por ello que los métodos moleculares basados en la amplificación del ADN se utilizan con fines diagnósticos de las infecciones causadas por este microorganismo. En Cuba se han realizado pocos estudios sobre la presencia de M genitalium en el tracto urogenital. El objetivo de la presente investigaciónfue detectar M genitalium en individuos cubanos sexualmente activos mediante la implementación de métodosde PCR simple. Se implementaron dos PCR simples para la detección de fragmentos de 427 pb del gen ARNribosomal 16S y 281 pb del gen de la adhesina celular MgPa de M genitalium, que se evaluaron en muestras de exudado endocervical provenientes de 300 mujeres con sintomatología urogenital y muestras de orina de 49 hombres asintomáticos sexualmente activos. Se logró un límite de detección de la PCR del ARNr 16S de aproximadamente 5 copias de genoma por reacción, mientras que para la PCR MgPa se logró la amplificación de solo 50 copias de genoma por reacción. El 3por ciento (10/300) de los exudados endocervicales y el 24,5 por ciento (12/49) de lasmuestras de orina de hombres asintomáticos resultaron positivas mediante ambas PCR. El mayor porcentaje demuestras positivas correspondió a las muestras de orina provenientes de hombres asintomáticos, que resultó superior a lo esperado. El presente trabajo permitirá realizar estudios futuros de caracterización genética y antigénica de las cepas de Mycoplasma genitalium circulantes en Cuba, útiles para conformar un inmunógenovacunal(AU)

ABSTRACT

The diagnosis of Mycoplasma genitalium infections by bacteriological culture is not feasible due to slow growthand that is time-consuming. Consequently, molecular tools using DNA amplification are widely used in the infectiondiagnosis. There are few reports in Cuba on infections caused by this pathogen. The aim of this study was todetect M genitalium in clinical samples from sexually active individuals, by two PCR assays. PCR-methods wereimplemented and evaluated on clinical samples for the detection of M genitalium using fragments of the 16SrRNA (427 pb) and mgpB adhesion genes (281 pb) as targets. The PCR assays were used on 300 endocervicalswabs from female patients with urogenital symptoms and on 49 first-void-urine samples from asymptomaticmales. The limit of detection of 16S PCR and MgPa PCR-assays were of 5 and 50 geq/μL, respectively. For theanalyzed clinical samples, 3 percent (10/300) of female swabs and 24,5 percent (12/49) of urine samples from asymptomaticmen were positive for M. genitalium by the two PCR assays. In contrast to the anticipated results, male urinesamples had the highest positive rate. Two PCR assays for the detection of M. genitalium were implemented andsuccessfully used on clinical samples, with the unexpected finding of a high positive rate in specimens fromasymptomatic men. The current work will allow performing future studies of genetic and antigenic characterizationof the circulating Mycoplasma genitalium-strains in Cuba, useful as vaccine immunogen(AU)