Modificación ultraestructural de las membranas derivadas del retículo endoplasmático y morfogénesis del virus de la hepatitis C en muestras de hígado humano / Ultrastructural remodelling of e ndoplasmic reticulum-derived membranes and hepatitis C virus morphogenesis in human liver samples

RESUMEN

Introducción: la infección por el virus de la hepatitis C es una de las causas principales de la enfermedad del hígado a nivel mundial. La utilización de la cepa del virus de la hepatitis C, JFH1 en cultivo de células de hepatoma ha permitido el avance de la comprensión del ciclo de vida viral. No obstante, se conoce poco sobre la morfogénesis del virus de la hepatitis C. Las dificultades para detectar el ensamblaje viral en este modelo de cultivo celular, así como los bajos niveles y complejidad de las partículas del virus de la hepatitis C en pacientes y chimpancés infectados limitan el estudio de la morfogénesis viral.Objetivo: estudiar las características ultraestructurales y los eventos de ensamblaje viral en hepatocitos de pacientes infectados con el virus de la hepatitis C.Métodos: se utilizaron muestras de biopsias de hígado de pacientes infectados, anticuerpos específicos para el virus de la hepatitis C y técnicas de microscopía e inmunomicroscopía electrónica.Resultados: la infección por el virus de la hepatitis C se relacionó con una modificación de las membranas derivadas del retículo endoplasmático y con diferentes microambientes citoplasmáticos en los hepatocitos de individuos infectados. La dilatación del retículo endoplasmático y la formación de diferentes vesículas de membrana son características que se asocian con los complejos de replicación viral. Resulta interesante destacar la detección del ensamblaje de partículas semejantes a la cápsida y al virus de la hepatitis C cerca de complejos de membrana con alta densidad electrónica y estructuras tubulares. Las proteínas estructurales del virus de la hepatitis C se detectaron en el retículo endoplasmático .Conclusiones: estos eventos sugieren que el proceso temprano de ensamblaje de las nucleocápsidas y del virión ocurre en las membranas del retículoendoplasmático que se asocian con estos microambientes citoplasmáticos en los hepatocitos humanos(AU)

ABSTRACT

Introduction: hepatitis C virus infection is considered as a leading cause of liver disease worldwide. Despite recent advances in understanding the hepatitis C virus life cycle using the highly replicative JFH1 strain in human hepatoma cells, little is known about hepatitis C virus morphogenesis. Low levels of hepatitis C virus assembly in this cell culture model as well as low levels and complexity of hepatitis C virus particles in infected humans and chimpanzees have hampered the study of hepatitis C virus morphogenesis in vivo.Objetivo: to study the ultrastructural features and viral assembly events in hepatocytes from HCV hepatitis C virus-infected patients.Methods: liver needle biopsies samples of patients with hepatitis C virus infection, specific antibodies against hepatitis C virus and transmission electron microscopy and immunoelectron microscopy analyses were used in this study.Results: ultrastructural studies in liver biopsies from hepatitis C virus-infected patients revealed that hepatitis C virus infection was related with remodelling of endoplasmic reticulum-derived membranes and with a variety of cytoplasmic microenvironments in hepatocytes. Dilated endoplasmic reticulum and formation of various membrane vesicles are features that have been associated with the viral replication complex. Interestingly, hepatitis C virus-like particles and core-like particles budding and assembly were observed near convoluted electron-dense membranes and tubular structures. Particularly, hepatitis C virus structural proteins localize to the endoplasmic reticulum.Conclusions: these events indicate that hepatitis C virus nucleocapsids and early virion assembly take place atendoplasmic reticulum membranes that are associated with these cytoplasmic microenvironments in human hepatocytes(AU)