Desarrollo linfoide de progenitores hematopoyéticos humanos transducidos con vectores retrovirales / Lymphoid developmental potential of human haematopoietic progenitors transduced with retroviral vectors

ABSTRACT

La terapia génica se contempla actualmente como una prometedora estrategia para el tratamiento de diversas enfermedades hematológicas. Sin embargo, la baja frecuencia de transducción de los progenitores hematopoyéticos constituye una importante limitación en el empleo de esta metodología. Por otra parte, la expresión estable de los genes transducidos ha resultado ser particularmente difícil de conseguir en células del linaje linfoide. El avance en esta área requiere, por tanto, la mejora de las tecnologías de transferencia génica, así como la optimización de las condiciones de cultivo ex vivo que permitan una transferencia génica eficiente en los progenitores hematopoyéticos humanos preservando intacto su potencial de diferenciación linfoide. En este trabajo se describe la idoneidad de los vectores retrovirales tipo Virus Epstein-Barr (EBV), portadores de la proteína verde fluorescente (EGFP) como gen marcador, para la transducción de los precursores multipotenciales CD34+ humanos. Además, se describe el desarrollo de sistemas experimentales de diferenciación in vitro que permiten la eficiente generación de células T maduras, natural killer (NK) y dendríticas (DCs) a partir de precursores multipotenciales intratímicos transducidos. Los datos obtenidos demuestran que la metodología utilizada en este estudio permite transducir de forma eficiente precursores hematopoyéticos multipotenciales humanos sin interferir con sus programas de diferenciación linfoide. Finalmente, se discuten las posibles aplicaciones de este sistema de transducción retroviral para el seguimiento y la optimización de protocolos preclínicos de terapia génica (AU)