Expresión de CD150 en leucocitos humanos. producción y caracterización de un nuevo anticuerpo monoclonal contra la molécula CD150 / Expression of CD150 on human leukocytes. Production and characterisation of a new CD150 monoclonal antibody

ABSTRACT

CD150, también conocido como Signaling Lymphocyte Activation Molecule (SLAM), es una molécula expresada en la superficie celular que se halla implicada en procesos de activación. Su región intracelular se une con elevada afinidad a SAP/SH2D1A, proteína codificada por el gen responsable de XLP (X-linked lymphoproliferative disease). En el presente trabajo describimos la producción y caracterización de un nuevo anticuerpo monoclonal (AcMo) contra la molécula CD150 (SLAM.4). Este AcMo murino (SLAM.4) fue producido utilizando células transfectadas con el cDNA que codifica para la molécula CD150 humana. Los experimentos de bloqueo demostraron que SLAM.4 se une a un epítopo distinto pero solapado al reconocido por el AcMo IPO-3. Además, los estudios funcionales demostraron que SLAM.4 inducía secreción de IFN- en linfocitos de sangre periférica preactivados vía CD3. SLAM.4 fue utilizado para analizar la distribución de la molécula CD150 diferentes poblaciones leucocitarias. Monocitos, granulocitos, eritocitos y plaquetas no expresaban CD150. Sin embargo, monocitos activados in vitro expresaban niveles elevados de CD150. CD150 se encontraba expresado en los primeros estadios de maduración de los linfocitos T ya que los timocitos inmaduros (CD4-C D 8-) expresaban una cantidad significativa de CD150. Los niveles de expresión mayores los encontramos en timocitos CD4+C D 8+, decreciendo a medida que maduran hacia CD4+ o CD8+. Los niveles de CD150 en linfocitos B de sangre periférica eran superiores que en células T. CD150 diferenciaba dos tipos de subpoblaciones tanto en células CD4+ como CD8+ pero especialmente estas últimas. Los linfocitos CD4 y CD8 más positivos para el CD150 expresaban grandes niveles de CD45RO+indicando que podrían corresponder a linfocitos T memoria/efectores. Nuestros resultados muestran la utilidad del AcMo SLAM.4 para realizar estudios funcionales de la molécula CD150 y revelan algunas características novedosas de su distribución celular (AU)