Evaluación de un método enzimático colorimétrico para la cuantificación de colesterol sérico / Evaluation of a colorimetric enzymatic method for the quantification of serum cholesterol

RESUMEN

Se evaluó un método enzimático colorimétrico para cuantificación de colesterol sérico, basado el la reacción de Trinder. La técnica consiste en mezclar 2,0 mL de reactivo de trabajo previamente preparado, con 20 uL de suero. La absorbancia es leída a 500 nm contra blanco de reactivos después de 15 minutos de incubación a 37 grados centígrados. El intervalo analítico es de 25 a 600 mg/dL. La comparación de los resultados con el método de colesterol total en suero por extracción dió una regresión lineal de Y=-0,4223+0,8907 (x), con un coeficiente de correlación (r) de 0,958 y una desviación estándar sobre la línea de regresión (Sy/x) de 24 mg/dL. Con el método Coleterol Fast Color se obtuvo una regresión lineal de Y=19,5+1,02 (X), un coeficiente de correlación (r) de 0,972 y una desviación estándar sobre la línea regresión de 13 mg/dL. Con el método Colestat la regresión lineal fue de Y=25+1,000 (x) con un coeficiente de correlación (r) de 0,983 y una desviación estándar sobre la línea de regresión lineal de 16 mg/dL. Las presiciones día a día para muestras con valores de colesterol bajos, normales y altos mostraron coeficientes de variación de 1,8; 9 y 1,5 por ciento y en un mismo día de 2,3; 3,3 y 2,4 por ciento respectivamente. La hemoglobina y el ácido acetilsalicílico en consentraciones de 50 mg/dL no bilirrubina produce una interferencia de 0,42 por ciento. El reactivo de trabajo almacenado en botella ámbar es estable por al menos 3 semanas a 2-8 grados centígrados. El reactivo es estable por lo menos un año si la solución consentrada de enzimas se almacena en congelación a -70 grados centígrados o en forma liofilizada, y por al menos dos meses a +4 grados centígrados. Las concentraciones óptimas incluyen 1,5 mmol/L de 4-aminofenazona, 0,5 g/L de Triton X-100, 3 mmol/L de colato de sodio, 16,umol/L de hexacianoferrato de potasio II, 15 mmol/L de fenol, 1000 U/L de peroxidasa, 250 U/L de colesterol oxidasa y 500 U/L de colesterol esterasa.