Caracterización de las cepas de Trypanosoma colombianas por medio de isoenzimas y reacción en cadena de la polimersa y su relación con el origen de aislamiento y procedencia geográfica / Characterization of Colombian trypanosome strains by isoenzymes and polimerase chain reaction and its relation with isolation origin and geographic provenience

RESUMEN

Se analizaron 42 cepas de trypanosoma provenientes de los bancos del CIMPAT y del INS, provenientes de varios sitios de Colombia y aislada de diferentes vertebrados (humanos, D. marsupialis, C. Lanatus R. rattus, Aotus sp. y murciélago) o de diferentes vectores (R prolixus, P. geniculatus y Triatoma sp). Para el análisis isoenzimático se utilizaron 13 sistemas enzimáticos diferentes según la metodología estandarizada en el Instituto de Biología de Altura de la Paz Bolivia. Se incluyeron también en el estudio cepas procedentes de Panamá, de Chile, de Bolivia y de Honduras y como patrones isoenzimáticos para T. cruzi una cepa procedente de Bolivia (SO34) y otra de Chile (MN). Se obtuvieron, 38 zymodemos con una gran variación de genotipos; teniendo en cuenta solamente dos cepas de (Omar González y Tc. Molino) que presentaron el mismo genotipo, como tambien el grupo de las cepas (MDID.531, MDID-R-46, MDID-69 y Fredy Chaparro). Las 7 cepas de T. rangeli fueron caracterizadas y diferenciadas de las cepas de T. cruzi por medio de la utilización de la enzima Me-1 =0. Las cuatro cepas de Trypnosoma aisladas de murciélago fueron caracterizadas como Trypnosoma sp. por que presentaron el perfil isoenzimático diferente al de T. cruzi y de T. rangeli. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se realizó con los "primers" GE12 y GE13 proporcionados por Campbell (Universidad de California), específicos para copiar la región que comprende el Gen-Mini- exón en T. cruzi como en T. rangeli, 27 cepas de Trypanosoma amplificaron repetitivamente, correspondientes a todas las cepas de T. cruzi aisladas de humano y de reservorios (D. marsupialis, C. lanatus, R. rattus), 6 del vector R. prolixus y una cepa de T. rangeli aislada del primate Aotus sp. Dos (MSA-111 y MSA-114) de las cuatro cepas aisladas de murciélago también amplificaron presentando un patrón de bandeo diferente a las demás cepas de Trypanosoma. La cepa de Crithidia sp. (M. Mayorga) utilizada como control positivo también presentó un bandeo diferente. Se caracterizaron treinta y una cepas de T. cruzi, siete de T. rangeli, tres de Trypanosoma sp. y una Crithidia sp. Las soenzimas y el PCR coincidieron con los resultados, diferenciando cuales son las cepas de T. cruzi, T. rangeli y Trypanosoma sp. dándonos una fiavilidad de estos dos métodos...