Seleçäo de fungos produtores de sacarose fosforilase e sua produçäo a partir do inhame / Screening, thermal properties and production in yam extract of fungal sucrose phosphorylase

RESUMO

Dentre 16 cepas de fungos testados, foram selecionadas 4 cepas como melhores produtoras da atividade sacarose fosforitase.Scytalidium sp e Colletotrichum gloesporioides apresentaram atividade sacarose fosforitase predominantemente intracelular, enquanto que em Sclerotinia sclerotiorum e Monilia sitophila, a atividade foi predominante extracellular.Altos valores de temperatura ótimas 50ºC e 40ºC foram encontrados respectivamente para a enzima de M.sitophila e para as outras 3 cepas selecionadas.Como sacarose fosforilase de M.sitophila foi a mais termoestável, retendo 90-95 por cento de sua atividade fosforolítica inicial após pré-tratamento na ausência de substrato, a 50ºC-70ºC durante 30 minutos, ela foi selecionada para estudos posteriores.A maior produçäo da enzima (340 UI/L de meio cultivado ou 0, 336 UI/mg de proteínas) foi obtida no início da fase estacionária de crescimento da M.sitophila cultivada em extrato de inhame com 0, 15 por cento de sulfato de amônio, à temperatura ambiente(28ºC-30ºC) e agitaçäo continua.Foram afetuados estudos preliminares de imobilizaçäo do extrato bruto da sacarose fosforilase, por adsorçäo em DEAE-celulose e ligaçäo covalente em quitosana.o melhor resultado foi obtido com o derivado imobilizado em quitosana o qual reteve 12 por cento de proteínas e 216 por cento da atividade específica inicial